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(四)辅助因素对产率的影响研究表明,在低熔点混合物中加入适宙:的有机溶剂能降低混合物的熔点,从 而提商酶反应的效率。图2-66所示为加入不同溶剂对反应产率的影响。其中, 加入二甲基亚砜(DMSO)和2-甲氧基乙酸乙酯(MEA>能使产率达到60%, 而辛醉和正己烷的加人使产率低于50%。这可能是因为疏水性的有机溶剂能够 改进和保持低熔点混合物的特性,从而能够促进酶反应的产率。图2 -66 不同辅助有机溶剂对反应产率的影响 注:有机溶剂都按丨5% (w/w)的比例加人,苄氧羰基-L-天冬氨酸二乙《和D-内氨酰胺分 别加人0.5mmOl, -胰凝乳蛋f*丨酶浓度为丨5% (w/w)和丨2% (w/w)的水,37?€下反庖丨Oh。表2-37同时加入DIV1SO和MEA作为低熔点混合物的辅助因子对反应产率的影响
在pH9,尿素6mol/L、/?_汰基乙W200mmol/L.三紙基中烷盐酸丨OOmmol/L 的级冲液,加入嗉吗甜至丨0-20mg/mL,通氮气,37t保持3b
(1) (2)
Van der Wei等人的研究表明,T. danieUii (TD)假种皮的水提取物主要含 有两种蛋白质,称为嗦吗甜I (T丨)和嗦吗甜II (T_)。Higginbotham等人对 TD所含其他次甜的蛋白质做了研究。1979年首次分析出T,的氨基酸顺序, 它是一条含有207个氨基酸的单链,由8个二硫键交联起来。应用凝胶色谱法 测定其相对分子质萤为21000,根据已知氨基酸计算出来的精确相对分子质量 为22209。它的竣基与氨基末端均为丙氨酸,没有异常的氨基酸、侧链取代 基、键合或末端变性等现象。在通常食物常见的氨基酸,只有一种组氨酸是它 所没有的。1982年Edens等人报道了嗦吗甜D氨基酸分析结果,认为嗦吗甜 II蛋白的氨基酸总数目与嗦吗甜I 一样,只是在46、63、67、76和丨丨3等5 个位罝上的氨基酸与嗦吗甜I不同(表5-2)。嗦吗甜n的精氨酸、谷氨酰胺 与天冬氨酸分别比嗦吗甜I多1个,嗦吗甜n的天门冬氨酰比嗦吗甜丨多2 个,嗦吗甜I的丝氨酸比嗦吗甜n多1个(表5-3)。显然,这几种不同的氨 基酸并不是嗦吗甜的主要组成氨基酸,因为嗦吗甜I、嗦吗甜n两种蛋白质的 甜味特性十分相似。两种蛋白的等电点p/也相似,都在丨1.5?12. 5之间,具 体精确的测定尚有困难。根据嗦吗甜n的氨基酸组成可计算出其相对分子质量 为22293,稍大于嗦吗甜丨的数值。
二、蔗糖的酯化、醚化和脱氧化衍生物
4f-氣-4f-脱氧-1, 4, 6-气氣-1, 4, 6-三 4*-氣-4*-脱氧-1,4.6-三氯-1,脫氧-a-D-吡喃半乳糖苷- 4, 6-=脫极-a-D-吡喃卞乳糖
两种方法均表明,在29位天冬氨酸的突变(以丙氨酸、赖氨酸或天冬酰氨 替代29位的天冬氨酸)都会生成甜度显著比Bimzein强的分子,而在30或33 位的突变(以天冬氨酸代替30位的赖氨酸或以丙氨酸代替33位的精氨酸)则 会使分子的甜味丧失。在办折叠K域也有相同的情形,当以赖氨酸代替41位的 谷氨酸时,分子甜度最髙,而当以丙氧酸代替43位的精氨酸时,也会导致甜味 丧失。这些结果表明,电荷对产生甜味有重要作用,相对来说,侧链的长度则不 那么f:要。同时,还发现N端和C端的结构对Brazzein的甜度也有很大影响。另 外一个重大发现是,人体和猴试验的结果之间存在者密切的联系。这就给假设 ——猴子S纤维的记录结果可用来估算在人体中同种甜味剂可呈现的甜度,提供 了有力的证明。
第一节嗦吗甜
表2 -24 符合下列通式化合物的结构与甜度的相互关系