揭西县二氢查耳酮
从表2 -65可明S观察到,三肽化合物存在与L -天冬氨酰-D -丙氨酰胺 相似的立体定向性。表2 -65 三肽化合物的立体结构与甜度的关系
人体肠中的细菌对安赛蜜无作用,它既无抗菌性,也不促进生长;也未发现 有代谢降解发生,故安赛蜜无蛀牙作用。
Kondo等人曾尝试构建一 SCM质粒并在C— idilis中生产SCM。他们把 SCM基因插入由产脘假丝酵母(C. utUis)克隆来的GAP基因的启动子和终止子 片段之间。通过这种方式,他们获得了高产虽的SCM,表达水平高于总可溶性 蛋白的50%。他们还尝试克降带S. cerevisiae GAPDH启动子的SCM基因用来生 产SCM。然而,所得的产最水平很低,仅为总可溶性蛋白的5%左右。美国一专 利公开了利用P. pastoris生产SCM的方法。首先将合成的SCM基因克隆于含有 S. cerevisiae a -因子分泌信号和GAPDH启动子的PGAPZa -载体,然后将构建的 质粒转化成P.P^tori5GS115,最后通过菌株对Zcocin的阻抗性,对转化株进行 筛选。观察发现所分泌的.1:组英奈林为一条12kji的带。SDS - PAGE分析表明, 通过该方法可获得约10g/L的SCM。这些SCM经纯化后可引起甜味。
(3)通过/V-(3, 3-二甲基丁基)-L-a-天冬氨酸-/3-酴酸肝和L-苯 内氨酸甲酯缩合来制备。N-(3, 3-二甲基丁基)-L-a-天冬氨酸-芦-酯酸 酐可以通过在P205、三氣化磷、酸酐等存在的条件下通过缩合两分子的/V- (3, 3-二甲基丁基)-L-a-天冬氨酸-召-酯形成。
DuBois等人测定了二氢查耳酮甜味达到最大值后降低至接近消失时所需的 时间,其试验结果见表4-19。从表中我们可以明显看出,新橙皮苷二氢查耳酮 甜度达到最大值的时间要比糖精和蔗糖都来得长,且持续时间也较长。定性观察 结果表明,HDG (DI)的甜味持续时间较n短。
美国一般根据一项14d的关于阿斯巴甜的消费量的详细调查资料,以及在饮 料中纽甜和阿斯巴甜甜度的比较(保守估计为31倍),来确定纽甜的使用量。 饮料是阿斯巴甜和纽甜所期望的主要使用范畴,而更为安全的一种预测纽甜消费 量的设想是用它来取代膳食中所有的阿斯巴甜。基于这些假设,美国食品与药物 管理局估计所有消费者中,预测纽甜的平均和90%的每日消耗最分别是0. 04和 0. 10mg/kg体重。因各国膳食模式的不同,在澳大利亚和新西兰,纽甜的预测每 日平均消耗萤分别是0. 02和0. 01 mg/kg体重,分别焙可接受每日摄入量的1% 和0.5%,纽甜的95%预测摄入萤分别为0.112和0.05111&^8体觅,相当于可接 受的每日摄人量的5. 6%和2. 5%。
甜叶菊原产地的人们将这种植物添加于茶叶中以增加其甜度,这是甜菊苷最 初的用途。近些年来,由于大规模的商业化生产以及安全毒理方面详细的研究结 果,使得这种天然甜味剂在工业上的应用日趋广泛。
也可以通过烟草表达莫奈林。首先合成了由噬菡体PI Cre重组酶介导的特异 ?组位点丨OXP的序列,构建了两个loxP同向重复的棺物表达栽体pGLX121. 1。 PCR定点突变了 CaMV 35S启动子元件中kozak序列,使kozak中的翻译起始密码 子ATG位于Ncol位点上。把spm基因克隆到表达载体pG〖MA的Ncol和PstI之 间,给甜蛋白8pm基因加上35S启动子和polyA及NOS终止子元件,然后克隆到 PGLX121. 1的EcoRI位点上,用农杆菌LBA4404转化烟草,获得卡那痗素抗性转 基因植株,经过PCR及southern分析,证明甜蛋白spm基因已整合到烟荩基因组 内。用转基因烟草的总RNA通过RT-PCR反转录扩增spm基因,证明了在35S启 动子及其他调控元件的控制下,spm基因在转基W烟草中转录表达出mRNA。提取 转基因烟草总蛋白,经SDS-PAGE分析,初步证明了 8pm基因在转基因烟草中表 达出目的甜蛋白。
(二)甜菊苷向甜菊双糖A苷的转化1977年,日本田中等人成功地通过酶水解,将甜菊苷转化成另一种天然双 蔽苷Ru丨)usoside (我国华南地区截薇科植物Rubus suavissimus的叶子中含有这种 糖苷,参见本章第五节),然后再通过三个步骤即可转化成双糖A苷,产率为 75%。甜菊苷向甜菊双糖A苷转变的化学途径见图4-16。
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