瑶海区AK糖
图4 - 35甘苹单甜素对2%蔗糖液中S. muians依附作州的影响
用固定化酶催化合成肽的反应条件优化要考虑3个因素:间定化酶的稳定 性、反应时间和平衡得率。图2-25 (1)所示为a = 15时,固定在Amberlite XAD-7的嗜热菌蛋白酶稳定性、平衡得率、相对起始反应速率。裁体内部最优 pH为5~6。当PH <5时,起始反应速率低且酶不稳定;pH >6时,平衡得率急 剧下降。在大多数情况下,多孔载体内的pH只由底物和产物的缓冲作用决定, 用酸或碱中和的方法很难调节。这是阂定化酶以非水溶性有机溶剂为介质催化合]’可增加酶的稳定 性,但得率仍会逐渐下降。在CSTR整个反应器中,底物和产物浓度各处均 相等。
日本的板元也是通过皂化方法转化甜菊双糖D苷成双糖B苷,而双糖A苷 则可通过水解酶转化作用转化成双糖B苷(图4-17)。
该转糖苷反应中,底物KU浓度及反应时间对转化率的影响见表4-13、图4-20。RU浓度较低时,RU-F合成速率较高,RU的转化率(RU-F/RU)在 反应初期达到最大。RU浓度0.025nu)l/L时,反应lh,达到最大转化率88%。 RU的转化率随RU浓度上升而下降,RU浓度0.5mol/L时,反应20h,转化率 为19%。S、RU的结果类似。S浓度0.025mol/L时,反应0.5h后转化率达 到 80%。
莫奈林娃从D. cumminsii的浆果果肉中提取出的甜味蛋白一般用水法抽提, 抽提液经离心分离、超滤浓缩后用离子交换色谱法提纯楮制,再经超滤脱盐后冷 冻干燥。起初,1kg浆果只能获得100?150mg的莫奈林,现在的提取得率已提 髙至3~5g。大批量处理时,可使用分批吸附法。先将水抽提液与分散在 0.02nu,l/L醋酸铵缓冲液(PH5.0)的吸附剂CM - Sephadex C25淤浆混合,接 着用水反复冲洗淤浆达到纯化的目的,然后用0.02mol/L NaCl溶液将吸附在 Sephadex上的莫奈林洗脱下来,超滤浓缩后冷冻干燥。这样分离得到的莫奈林, 若在离子交換色谱柱上分别用NaCl浓度呈梯度上升的PH7. 6和PH8. 2缓冲液进 行洗脱,还可进一步分级成5种纯组分,依次称为莫奈林I ~V,其中最主要的 是莫奈林IV。
美国的糖精制造商PMC Specialties集团有限公司,于1985年购买了原 Sherwin - Williams公司,他们使用比较先进的Maumee合成途径,如图6 - 13所 示。首先在0~51下往氨茴酸钠溶液中添加亚硝酸钠盐(在有硫酸存在条件 下),然后将生成的重氮化物质加到二硫化钠中,酸化之后,结晶析出有机二硫 化物。将收集到的二硫化物洗涤、离心分离并千燥后,在硫酸溶液中使之与甲醇 发生酯化反应。所生成的酯化合物与氣气发生氧化作用转变成邻甲酯基磺酰氣, 再与过景氨作用生成糖精铵,用硫酸中和之即成糖精。
在脉冲前,细胞经二硫苏糖醇(di丨hiothrehol,DTT)处理或在样品中加人载 体DNA都+能提高转化率。用标准醋酸锂程序(standard lithium acetate procedure) 将线性PCLRE2转化至CandUu utULs得到的转化率非常低,1网DNA的转 化体不到10个。
奇异果素是一种糖蛋白。早期的分析认为其蛋白质部分由373个氨基酸组 成,相对分子质遗3000?42000,等电点在PH9附近。表5-14列出奇异果素的 氨基酸组成。有关多糖部分的分析结果差异大,有一种结果只检测出阿拉伯糖和 木糖两种水解单糖,含量占奇异果素总量的6.7%。另外的结果是水解共得到5 种单糖:葡萄糖、核糖、阿拉伯糖、半乳糖和鼠李糖,总含萤山 15% -21.0% ; 还有一种分析结果测出4种单糖:岩藻糖、木糖、拄雜糖和半乳糖,总含量 6.3%。如此显著的差异,很可能与样品的纯化程度有直接的关系。
由此导致的结果是,(3)表征的味感不仅不甜,反而是苦的。由此,AH-B-X 理论可以很好地解释苯环的位置不同与产生甜味作用的关系。