长清区结晶果糖
通过增加浓度进行品尝来测定三氯蔗糖的甜味阈值，敏感者的甜味阈值浓度 是0.00014%，较不敏感者为0.00113% ,平均值为0.00038%。而用蔗糖进行同 样品尝的结果表明，其阈值为0.07%和1.13%，平均值为0.31%。由此数值计 筲出三氯蔗糖的甜度，为蔗糖的815倍。
六、甜蛋白的作用机理
1980年以后世界上有很多专利描述了甜菊苷可通过与其他一些物质 (包括甜物质）混合配制出许多供工业化生产或家庭使用的新型复合甜味 剂。这些复合甜味剂包括：甜菊苷与蔗糖的混合物；甜菊苷与葡萄糖的混合 物；甜菊苻或甜叶菊提取物与木糖的混合物；甜菊苷与蔗糖粉混合制成的一 种颗粒状产品（再加一些糖或糖密还可以浇注制模水溶性甜菊提取物与 氢化淀粉水解物在表面活性剂蔗糖脂肪酸酯作用下混合后经喷雾干燥而成的 制品；甜菊苷分散于熔融的氢化油后经冷却固化、破碎后分散于蛋白溶液中 凝结而成的制品；甜菊苷外包蔗糖的甜味剂；甜叶菊提取物和/或a-葡糖 基甜菊苷与异麦芽酮糖的混合物；浸溃于单糖、双糖和糖醉的甜菊提取物经 模制干燥而成的产品；甜菊苷与山梨糖醇、乳酸或乳酸钠的混合物；甜菊苷 在麦芽三糖聚合物水溶液中与天然甜味剂混合而成的一种膜状甜味剂；甜菊 苷与糊状麦芽糖醇的混合物；甜菊苷与甘草酸和氣化钾的混合物；甜菊苷与 乳酸钙、酒石酸钠、氣化钾或氯化钠的混合物；甜菊苷与蔗糖、麦芽糖醉混 合而成的一种低能世甜味剂（其甜度近似蔗糖）；甜菊苷与阿斯巴甜混合而 成的一种对酸稳定的甜味剂；在水溶液中甜菊苷与葡萄糖混合而转变为甜菊 醉糖苷与果糖的混合物等。
使用产物沉淀法，当L - PheOMe过贵时在水溶液反应也能有很髙的得率， 其中Z - L - Asp - L - PheOMe与L - PheOMe形成不溶性沉淀。各取底物 2?10mL水中混合，并加人10mg嗜热菌蛋ft酶，起始pH6~8，在 概保持3 ~5h可得到Z-L-Asp-L-PheOMe ? L - PheOMe白色沉淀，该沉淀 得率大于95%。研究还发现，以外消旋化合物为反应底物时，只有L-PheOMe 参与缩合反应得到产物为Z-L-Asp-L-PheOMe，但D - PheOMe也能与Z-L- Asp-L-PheOMe形成沉淀。根据这些研究结果，Tosoh公司开发了生产工艺流程 (图2-20)，并在1984年完成了中试。
低熔点混合物是指反应物按一定比例混合后得到熔点比反应各成分的熔点都 要低的混合物。用这种混合物作为溶剂的反应也称无溶剂反应。2000年，Chuly oung Kim等用无溶剂反应的方法合成阿力甜二肽的衍生物N -苄氧羰基-L -天 冬氨酸乙酯-D-丙氨酰胺（W-CBZ-L-A8P (OEt) - D-AlaNH2),其中 N -苄氡羰基-L -天冬氨酸乙酯-D -丙氨酰胺是通过N -苄氧羰基-L -天冬 氨酸二乙酯（/V-CBZ-L-Asp (OEt) OEt)和 D-丙氨酰胺（D-AlaNH2)在 ? -胰凝乳蛋A酶的催化下缩合而成。Chulyoung Kim等还研究了此低熔点混合物 的特性和最佳反应条件。
(1 )采用 土 chrysogenum 的 B2 培动子（2)采用 P. chrysogenum 的 pcbC 启动子 (3) /l.rjwamori 的 gdhA 肩动子（4) /!? n/rfuimM 的 gpdA 启动子
(2)没有能量价值，人体摄取后不会引起发胖。
二、Brazzein的物化性质与甜味特性
毒性试验中也出现了唯一与纽甜有关的可逆转的临床生化变化，在给兔、狗 做为期13周剂量为0.6g/(kg_d)和为期一年剂鱼为0.8g/(kg ? d)的试验时， 出现了特异的肝脏碱性磷酸酶升高（4~5倍于对照组）。其他肝功能试验（如天 冬氨酸转氨酶、丙氨酸转氨酶、谷氨酰转移酶和总胆色素）都没有改变，也没 有肝、胆道、胃肠道或骨的组织病理学发现。动物的单一碱性磷酸酶活性可以在 没有任何病变的基础上升高，是一种生理的适应，尤其是当环境改变时，并不是 添加纽甜所特有的。有试验也显示出人在食用13周纽甜以后没有出现碱性磷酸 酶和其他肝功能试验的改变。这表明在给予数千倍于预测消耗剂量的纽甜，在 兔、狗身上所观察到的可逆转的种系特异的血浆碱性磷酸酶活性升髙现象，是一 种非特异性的生理反应而不是毒性作用。
