汨罗市海藻糖
①甜菊苷的甜度约为蔗糖的200倍；
注广，从氨基洎开始计算。
商业化甜菊苷提取精制方法，大多属于专利范围，为专利所有者掌握。从发 表的专利文献上肴，生产工艺包括用水或乙醇提取、脱色，之后用离子交换树脂 法、电解法或添加沉淀剂法进行提纯，后经结晶干燥而成。图4-4所示为一典 型的提取工艺流程。虽然可用乙醉类有机溶剂进行提取，但生产厂家更喜欢使用 水提取法。
四、利用环糊精葡糖基转移酶改性甜菊苷
另有人把蕺菌血红蛋白基因(vgb)基因在毕赤酵母中的功能应用于高甜度 莫奈林所组酵母，解决毕赤酵母高密度发酵中存在的供氧不足的问题，进一步提 高髙甜度莫奈林的产萤。他们将获得的由高甜度莫奈林和vgb两个基因同时整合 的重组酵母GSU5/pPIC9M/pPlC3.5kV,以甲醇诱导，高甜度英奈林基因和vgb 基W分别以分泌和胞内的形式得到表达，且表达产物均有生物活性。VHb在胞 内的成功表达，使重组毕赤酵母高甜度莫奈林的分泌表达量提高了 20%，达
采用电穿孔法，将质粒转至产朊假丝酵母(Candida ulUis)中。该方法较简 单并能实现Candida utUis的高效转化。对转化条件进行优化以达到最优转化率。 据研究，酵母在最优电脉冲转化率下存活率为50% -70% ,因此通过调整场强、 内阻和电容大小，使Candida utUis的存活率达10%?70%。在加了4(Vg/mL CYH的YPD平板培养基上培养C— ulUis转化体（4(Vg/mL CYH是野生塑 Candida ulilis能在YPD培养基生长的最高浓度），进行CYH抗性转化体选择。 YPD培养基组成为：2%葡萄糖、l%BaCto酵母抽提物、2%Bacto蛋白胨。由于 电脉冲导致酵母细胞膜的破裂，使细胞对渗透压更敏感，因此电脉冲处理后细胞 立即在YPD培养基上培养不形成菌落D电脉冲处理后细胞立即分散在选择性培 养基，也不能得到CYH抗性菌落，需在30弋含lmol/L山梨糖醉的YPD培养基 上预培养一段时间后，再转移至含CYH的培养基才能得到转化子。
图2-33给出用阿斯巴甜增甜的饮料中天冬氨酸的含虽与日常食品中天冬氣 酸含量的对比。从中可以看出，香蕉中天冬氨酸含摄为丨29mg，而含阿斯巴甜饮 料只含有72mg，100g熟鸡中天冬氨酸的含量甚至为2764mg。图2-34所示为一 个9岁儿童每天从日常膳食或阿斯巴甜中获取的天冬氨酸的典型数虽。
三、利用产朊假丝酵母生产莫奈林
R93-17乙酰箪迁移的反应机制
