惠阳区木糖醇
(2)通过对接计算而柑的两个Aoc - AB和10个分子嗦吗甜结合的观察阁 (淡绿色部分为T1R2,深绿色部分为T1R3,红色部分为嗦叫甜分子)过去,人们就已经发现甜味蛋白之间几乎不存在序列相似性和结构相似性, 但却依然认为它们与受体通过相同的机制相互作用。那么,它们的共同点是什么 呢?它们都在结构表面有一个相似的楔形结构,这一结构与受体的外部空穴发生 相互作用。大部分这些甜蛋白的相互作用面都有相似的静电性质,从而与活性位 点的静电势互补。
2.计算机模拟识别计算机模拟技术进一步证实了以上观点的正确性,并肯定了果糖基部分在充当 蔗糖生甜团X功能部位的重要性。模拟结果表明,蔗糖分子中确实存在上述两对 AH/B双官能实体,Bdr-OH/2-O和y-OH/2-O,前者连接三个Kiei?疏水部位 X于r-H、6-H和后者连接两个这样的中心于厂-H、6-H,而且,这些疏 水部位X与AH、B基团组成甜昧三角形生甜团时的构象均与预期的顺时针方向一致。
四、三氣蔗糖的甜味分子识别
6)自洛乳酿小球菌(Micrococcus caseolyticus)的阿斯巴甜水解购能在与 水混溶的冇机溶剂中将不带保护基的L-天冬氨酸与苯丙氨酸甲酯缩合生产阿斯 巴甜。
莫奈林娃从D. cumminsii的浆果果肉中提取出的甜味蛋白一般用水法抽提, 抽提液经离心分离、超滤浓缩后用离子交换色谱法提纯楮制,再经超滤脱盐后冷 冻干燥。起初,1kg浆果只能获得100?150mg的莫奈林,现在的提取得率已提 髙至3~5g。大批量处理时,可使用分批吸附法。先将水抽提液与分散在 0.02nu,l/L醋酸铵缓冲液(PH5.0)的吸附剂CM - Sephadex C25淤浆混合,接 着用水反复冲洗淤浆达到纯化的目的,然后用0.02mol/L NaCl溶液将吸附在 Sephadex上的莫奈林洗脱下来,超滤浓缩后冷冻干燥。这样分离得到的莫奈林, 若在离子交換色谱柱上分别用NaCl浓度呈梯度上升的PH7. 6和PH8. 2缓冲液进 行洗脱,还可进一步分级成5种纯组分,依次称为莫奈林I ~V,其中最主要的 是莫奈林IV。
4.对甜味分子空间结构要求的设想由于甜味感觉对底物的要求可以是小如CHC13分子,到大如多肽和大分子蛋 白质,因此可以认为,甜味化合物和甜味蛋白受体之间最初的相互作用,发生在 受体表面部分。对于那些与受体之间无疏水接触的甜味剂分子,由于这种表面吸 附之间的作用力相对较低,故其甜度也低,这也许就是糖和糖醉均不是很甜的原 因。对于那些与受体之间有一处或多处疏水键合的甜味剂分子,除了在AH、B 基闭上的两点接触外,更包含有空间上的疏水键合,这种更深层次的键合则很可 能发生在甜味蛋白受体中类似酶活性位点的“嵴”或“裂缝”中。
大鼠及小鼠摄入髙达20g/kg的嗦吗甜也没出现急性毒性。用分别含嗦吗甜 1%、4%、8% 及 0.3%、1.0%、3.0% 的饲料喂养小鼠(90d),以 0.3%、 1.0%和3. 0%水平喂养beagle狗进行亚急性毒理试验。试验表明嗦吗甜的摄人 对动物体敢、采食萤、临床病理、宏观和微观病理等均没有影响,除了 8%水平 组雌鼠出现轻微的肝重萤增大外,没发现任何与处理冇关的生理变化。
用固定化酶催化合成肽的反应条件优化要考虑3个因素:间定化酶的稳定 性、反应时间和平衡得率。图2-25 (1)所示为a = 15时,固定在Amberlite XAD-7的嗜热菌蛋白酶稳定性、平衡得率、相对起始反应速率。裁体内部最优 pH为5~6。当PH <5时,起始反应速率低且酶不稳定;pH >6时,平衡得率急 剧下降。在大多数情况下,多孔载体内的pH只由底物和产物的缓冲作用决定, 用酸或碱中和的方法很难调节。这是阂定化酶以非水溶性有机溶剂为介质催化合]’可增加酶的稳定 性,但得率仍会逐渐下降。在CSTR整个反应器中,底物和产物浓度各处均 相等。
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