荣县索马甜
对天然和变异莫奈林的构型研究表明，莫奈林的三维结构和两条硫醉蛋白酶 抑制剂——Cystatin和Stefin B非常相似，这说明莫奈林除了甜味外还可能有其 他一些生物学功能。
Sun等尝试了在转基因马铃磐中生产重组马槟榔。研究人员把全长马槟榔基 因克隆于带马铃薯块茎特异性patatin启动子和来&胭脂碱合成酶基因的终止序 列（NOS. sub. ter)或带CaMV 35S启动子和NOS. sub. tei■的栽体，并把基因和栽 体转染至马铃薯。他们用Southern印迹法分析了转基因植物并通过Northern印迹 法证实了马槟榔n被成功转录。
加拿大健康保护局（CHPB)的一份研究是用雄、雌白鼠各50只，糖精虽 均是5%，幼畜断奶后喂以代饲料，两代动物喂养终身。试验表明第二代动物出 现了生长速度减慢现象（虽然其饲料摄入量并不减少），但繁殖力、寿命和血液 参数等没有变化。虽然在一些动物身上发现了明显的膀胱结石和肾结石，但其发 生率与试验处理没有关系。对照于控制组，5%糖精组的第二代动物上发现了明 显的膀胱肿瘤病变。
莫奈林分子的四级结构与其功能紧密相关。研究发现，莫奈林完整的天然构 象是其甜味产生的必要条件，而单独的A链或B链均没有甜味；同时，天然的 莫奈林分子具有一定的抗蛋白酶的消化能力，但经长时间、过量酶消化后的片段 也不具有甜味。目前，研究人员已经搞清楚的是，甜蛋A中游离的竣基是以离子 键的形式与甜味受体结合从而引发甜味。
由于酵母宿主中内源有对CYH敏感的L41基因，因此细胞中需有多个该标 记基因（3 ~ 10拷贝/细胞）以选择CYH抗性转化体。为增加每细胞中整合载体 的数目，通过从5#端缺失CYH抗性基因的启动子区域构建启动子缺失的CYH抗 性基因的质粒[图5-13 (1)]。该质粒在rDNA片段处线性化后转化至 尽管在亲代质粒PCLRE2 (图5-14)和pCLREll间没有显著的转化率差别，但 进一步的缺失会降低转化率。pCLRE15和pCLRE16的转化率约是pCLRE2的 15%，pCLRE17约是pCLRE2的0. 3%，PCLRFJ8则没有产生转化体。以丨41基 W在每细胞中的拷贝数为2计，经估计拷贝数最多的PCLRFJ7的拷贝数达到每
将 20g4-PAS (0.036mol)加人 100mL 含 2 ~ 10mL 乙酸（0.035 ~0. 175mol) 的甲基异丁基酮中，加热回流3?4h,部分浓缩。冷却此溶液到601，加庚烷冷 却结晶，经洗涤干燥得到固体产物，为2，3，6, 3\ r -五乙酸蔗糖醋 (6-PAS〉。
酯基苯磺酰説。将苯磺酰氣酸胺化后冉酸化即为糖楮，再与NaOH或磷酸氢钠反应
(分解）]。反应方程式为：
在一些甜味蛋白中，广泛的表面区域呈碱性对引起甜味起莆要作用，因此, NBS的这些碱性氨基酸群有可能对Neoculin的甜味和味道修饰作用也起着重要作 用。这些碱性氨基酸群含有两个pA为6.0的组氨酸残基。由于Neoculin在中性 pH条件下仅引起轻微的甜味，而在酸性条件下引起强烈的甜味，因此这些组氨 酸残基可能是Neoculin甜味和味道修饰作用产生的必要条件。
投人大工业生产最有效的途径仍是微生物发酵生产。近年来科学家们对真核 基W在原核中表达产物的功能进行了充分研究，认为有些基因产物尽管加工过程 不完善，只要给予合适的体外环境，它们可以重折叠成具备真核基因功能的三维 构象，从而恢复功能活性。因此选择合适的表达载体和摸索合适的体外条件去形 成有完全或部分活性的功能蛋白仍是一项有吸引力的工作。
