含山县二氢查耳酮
人们对新橙皮苷二氢奄耳酮在不同温度和pH下的稳定性情况也做了研究。 在室温水溶液中，pH大于2时，n不会水解生成游离单糖和糖苷。即使有时发 生水解现象也不会完全失去甜味，因为橙皮素二氢査耳酮也有甜味，尽管溶解度 不大。n在loot、pH2~10的缓冲液中至少可以稳定8h。根据实验的结果，新 橙皮二氢查耳酮水溶液室温下见光保存几年后，颜色略为变黄，但几乎觉察不出 甜味有何变化。
表3 -8 酶法水解四氣棉轩糖制备的酶活力比
折吞复性试验表明：嗦吗甜不仅还原变性不容易，折叠复性也很闲难。在折 祛过程中，变性蛋白质的疏水作用和16个巯基间形成的不规则二硫键使大部分 变性蛋自发生凝聚，因此植物嗦吗甜折奋必须在极低浓度并且可控的条件下缓慢 进行。但即使天然嗦吗甜初始浓度为2(Vg/mL，最后总得率也只有约1% (O^jtg/mL),仅能被WA或高度浓缩后进行品尝试验才能测定。鉴于这些试验 成效小，因此需要寻求低成本且更髙效地从变性酵母嗦吗甜中得到天然结构的 方法。
(8)对大鼠和狗的研究表明它对胰賍和血液中葡萄糖含量也没有不良 影响。
由于合成阿力甜二肽的氨基酸具有疏水性，在水中很难溶解，同时二肽反应 的过程中会产生水，因而此反应在水相中的效率较低。但若在有机相中反应，有 机相会改变酶的构象，致其变性，最终也将导致反应效率降低。而在低熔点混合 物中进行疏水氨基酸二肽合成反应，就能较好地解决这个问题。
(I) Braaein的氨廣酸序列（2〉Bnurein的一.绂结构单元
C.ti/而的基因组的DNA文库中分离得到3-磷酸甘油醛脱羧酸酶（GAP)基 因，其DNA序列测定后发现有一 1005hp的ORF片段0从C. utUis中得到的 GAP基㈥克隆至6.5kh ￡co/U片段。起始密码子上游的Ikb片段（-976? -1，推断+丨为翻译起始位点）作为启动子，用引物在V端加上N?d位点， 在3'端加上Xbal和BamHI位点。终止密码子下游0.7kb片段（+ 1006? + 1728)作为终止子，用引物在V端加上BamHI位点，在V端加上Pst丨位点， 将两片段在pBluescript SK的No丨丨和Pst丨位点间连接，构建得质粒pGAPPTIO (图5 - 15)。含单链莫奈林的0RF的0. 3kb的Dral - Bgl D片段插至pGAPPTIO 的平头Xbal位点和BamHI位点之间构建得PGAPM3。含rDNA片段的表达质 粒如下构建：从pCLRE2 (图5-14)中分离得到的含部分rDNA的1.2kb Apal 片段插至pBluescript SK的Apal位点构建得质粒pCRAl。在pCRAl的Xhol切 割平头端连接上Sphl连接体构建得pCRA2，在pCRAl的Asp7丨8切割平头端 连接上Notl连接体构建得pCRA3。pCRA3的1.2kh rDNA切割为0.5kb和 0. 7kh Notl - Bgl n片段后连接到质粒pUCBgl的Bgl n位点，构建得质粒 pCRA10o其中质粒pUCBgl由pUC19经EcoRI和HindHI酶切，并在Klenow酶 切处理后在切点处连接Bgl D连接体构建得到。质粒pCRA2经Sphl和EcoRI 酶切后，与由PCLRE16分离得到的含CYH抗性基因的1. Ikl, Sphl - KcoRI片 段连接构述得pCLR216。质粒pCRAlO经Xhol和Ps丨I酶切后，与含CYH抗性 基因的丨.1比？311-5&丨1片段（-184?+974)连接，构建得到pCRALll。从 PGAPM3分离得到的含莫奈林表达盒的2. Okb Notl - PstI片段插至pCLR216的 Notl和PstI位点构逑的质粒PCLRM216 (图5 - 16),插至pCRALl 1的Not丨和 PstI位点间构建得到质粒pKMll (图5-16)。C. W/is的URA3基因经与 的ura3突变子减基互补克隆得到，用作整合目标。URA3的801bP ORF 的 区域（+4?+356)和 3'区域（+356 ~+685)分別为 SaH-Bgin 和Bgl丨丨-AsP718片段，这两个片段插至pUC19的Sail和AsP718构建得质粒 pURAl0在pURAl的Hindffl酶切端和Asp718酶切平头端加上Not丨连接体分 别构建得到pURA2和PURA3。从pURA2的5,端分离得Noll - Bgl H片段，从 PURA3的1端分离得BglD - Notl片段，两片段连接至质粒pUCBg丨的Bgin位 点构建pURAlO。含CYH抗性基因的1. lkb PstI - Sail片段插至pURAlO的Sail 和PstI位点间，构建得pURALl 1。含莫奈林表达盒得2. Okb的Notl - PstI片段 插至pURALll的1^11和？8|丨位点间构建质粒pUMll (图5-16)。
190年前，英国外科医生Daniell报道了西部非洲一种热带植物浆果的奇异 性质，并引用了早在1725年由法国旅行家Des Marchais描述的文献，认为这种 浆果可以掩盖医药物品的苦后味。1919年，美国Fairchild注意到该浆果加人啤 酒中会带来一种强烈的甜味刺激，但遗憾的是他没有继续探索下去。直到20世 纪60年代初，Inglett等人在寻找筛选具有不寻常味觉特性的热带植物时重新发 现了它。1964年，加纳开始研究这种热带植物的园艺学特性。1968年，美国和 荷兰的两个独立研究小组分别报道了从浆果中分离出的活性物质，并进行了部分 鉴定分析工作。到这个时候，该植物已引种至拉丁美洲的波多黎各岛及美国的佛 罗里达大学，并在1%9年禁用甜蜜素之前引起人们广泛的兴趣与重视。
即成糖精钠盐，或与Ca (0H)2反应生成糖精钙。
干燥状态下的糖精贮藏数年后未发现任何分解现象。De Gartno等人发现糖 精水溶液在pH3. 3 ~8.0范围内、150T温度下维持lh没发现任何变化，用先进 的髙压液相色谱分析技术已证实了这个结果。只有经髙温、高压和低pH等极端
