陆川县二氢查耳酮
通过构建Neoculin的质子化和未被质子化的分子动力学模拟，他们研究了 酸碱度对Neoculin结构的影响力。图5-28 (1)和（2)所示为从模拟中获得的 Neoculin分别在被质子化（即中性条件下）和质子化了（即酸性条件下）的条件 下的典型结构u
采用高效液相色谱（HPLC)对精制后的三氣蔗糖产品进行鉴定，与Tate & Lyle公司所提供标准样品的HPLC分析谱图比较，确定三氣蔗糖终产品的纯度 为 99%。
本研究用二甲基甲酰胺（DMF)和氣化亚砜制备Vilsmeier试剂，此反应为 放热反应。将8.4mLDMF预冷至0T，加入8.5mL氣化亚砜，搅拌反应30min， 温度控制在50弋以下。反应结束后加人lOOmL DMF，将混合液冷却至Ot,在 20T：以下缓慢加入15g6-PAS (Vilsmeiei?试剂：6-PAS =4:1),在0弋下保持 15min0慢慢升温至70T,通人氮气来赶走部分HC1，此温度下维持30min后再 逐渐升温至100?12(rC，恒温反应3~5h,趁热以活性炭脱色，浓缩滤液，冷却 后有晶体析出。待结晶完全后过滤，用无水乙醉重结晶，得到白色针状晶体，为 4，丨\ 6'-三氣-4,丨\ 6、三脱氧-2, 3, 6，3\ V-五乙酸半乳蔗糖醋 (TOSPA)。
急性毒理试验是以同时包含甜菊苷和甜菊双糖苷A的提取物为原料的。含有 50%甜菊背和40%甜菊双糖苷的甜菊提取物对大鼠的f?数致死虽LD?为3.4g/kg, 对小鼠的半数致死量为17 ~42g/kg。Med?n认为用双糖A、B、C苷，甜菊醇生糖 苷和卫矛A苷口服喂养小鼠均无毒。Alcashi等人用含双糖A苷和甜菊苷的甜叶菊 水提取液喂养小鼠3个月进行亚急性毒理试验，也没有发现任何有害作用。
三、甘茶甜素
关于二氢丧耳酮的甜度，人们早有报迫，（;imdagni等人的研究结果见表 4-18，在或靠近阈值浓度时，新橙皮苷二氢查耳酮（D)的甜度是蔗糖的1800 倍。随着浓度的增加，D相对于蔗糖的甜度下降，当蔗糖浓度为5%时，丨丨的甜 度大约只有蔗糖的250倍。柚苷二氢查珲酮（I)和HDG (111)也同样有类似 的甜度下降趋势，但HDG下降得要慢一些。二氢查]]：酮甜度与浓度关系可用近 似式S = A：C°來表示，其中S为蔗糖浓度，C为与蔗糖甜度相等时的二氢查耳酮 浓度，A：和o为常数3当1、II和EI的尺分别为532、1703和456时，o值分別 为 0.639、0.644 和 0.734。
选用正交表L,6 (44)安排试验，试验方案如表3-5所示。 表3-S 三苯甲基化和乙联化反应正交试賒
子[图5 -7 (3)]和的gpdA启动子的转化菌得到的结果最好 [图5-7 (4)]，它们大部分转化体的嗦吗甜得率大于2mg/L,部分达到 9 ~ 11 mg/L；而采用P. chrysogenum的pcbC启动子（参与靑范素的合成）和 A. chrysogenun的B2酯酶启动子的尚株表达效韦都不高。
