清镇市结晶果糖
四、三氣蔗糖的甜味分子识别
由于酵母宿主中内源有对CYH敏感的L41基因，因此细胞中需有多个该标 记基因（3 ~ 10拷贝/细胞）以选择CYH抗性转化体。为增加每细胞中整合载体 的数目，通过从5#端缺失CYH抗性基因的启动子区域构建启动子缺失的CYH抗 性基因的质粒[图5-13 (1)]。该质粒在rDNA片段处线性化后转化至 尽管在亲代质粒PCLRE2 (图5-14)和pCLREll间没有显著的转化率差别，但 进一步的缺失会降低转化率。pCLRE15和pCLRE16的转化率约是pCLRE2的 15%，pCLRE17约是pCLRE2的0. 3%，PCLRFJ8则没有产生转化体。以丨41基 W在每细胞中的拷贝数为2计，经估计拷贝数最多的PCLRFJ7的拷贝数达到每
四、三卤代苯甲酰胺
本研究用二甲基甲酰胺（DMF)和氣化亚砜制备Vilsmeier试剂，此反应为 放热反应。将8.4mLDMF预冷至0T，加入8.5mL氣化亚砜，搅拌反应30min， 温度控制在50弋以下。反应结束后加人lOOmL DMF，将混合液冷却至Ot,在 20T：以下缓慢加入15g6-PAS (Vilsmeiei?试剂：6-PAS =4:1),在0弋下保持 15min0慢慢升温至70T,通人氮气来赶走部分HC1，此温度下维持30min后再 逐渐升温至100?12(rC，恒温反应3~5h,趁热以活性炭脱色，浓缩滤液，冷却 后有晶体析出。待结晶完全后过滤，用无水乙醉重结晶，得到白色针状晶体，为 4，丨\ 6'-三氣-4,丨\ 6、三脱氧-2, 3, 6，3\ V-五乙酸半乳蔗糖醋 (TOSPA)。
阿力甜二肽的衍生物/V -苄氧羰基-L -天冬氨酸乙酯-D -丙氨酰胺通过 a -胰凝乳蛋白梅催化/V -苄氧羰基-L -天冬氨酸二乙酯和D -丙氨酰胺的缩合而 得到。其中，/V-苄氧羰基-L-天冬氨酸二乙酯由AT-苄氡羰基-L-天冬氨酸通 过Fieser亚硫酰氣法制备；D -丙氨酰胺则是由D - AlaNH2 ? HC1经Amberiite 1RA 400-OH离子交换树脂处理后得到。
(二）嗦吗甜的表达
(一）嗦吗甜的稳定性
表S -16 奇异果柰糖基化位点连接寡糖结构及分布
疏水结合基团X的引人成功地解释了高效甜味剂的强力效应，即所有未被 取代的糖分子都是亲水性的，与甜味蛋白受体的结合力较弱，所以不会太甜。而 通过在适当位置引人合适的疏水基团可有效增加糖分子的疏水性，从而显著增强 糖分子与甜味蛋白受体的作用力，大大提高了甜度。很显然，X疏水基团是影响 化合物甜度的一个控制因素，但并不是所有的甜味化合物都有这样的疏水部位， 因此它不是甜味的先决条件。
在Ames试验中（沙门氏试验菌种为 TA98、TA100、TA1535、TA1538)和哺乳动 物细胞（中国仓鼠）的试验中，都未发现有 遗传畸变现象。观察中国仓鼠染色体的畸变或阁安#炎的工艺流程简图 用45~4500<1^体宽的剂童对小鼠的细胞核进行试验，都未见到畸变现象。另外 小鼠的纤维细胞研究，也没冇发现恶性变化，也不与DNA结合，对肝、胆也不产 生不良影响。这些遗传学毒理试验均表明，安赛蜜对遗传不产生毒性作用。
