资中县纽甜
(四）纽甜结晶特性及相应晶体的制备
二、二氢查耳酮的甜味特性与物化性质
综合上述分析，天冬氨酰残基在水溶液中优先存在的构象是Dn，这点在众 多研究中结论是一致的。对于C-端氨基酸残基来说，有4 ~5个研究认为它在 阿斯巴甜或其蛋氨酸同型物中优先存在的构象是Fd。因此，甜二肽的优先构象 就是FdDu。但Goodman等人分析却认为应该是F,Dd构象。虽然对优先存在的 构象没有一致的看法，但对由于苯基及天冬氨酰基偏转（Fb*Fb)引起的弯曲 构象的看法相一致。
安赛密的甜度与对照物蔗糖液的浓度有关，大约是3%蔗糖液甜度的200 倍。随着蔗糖液浓度的增大，其相对甜度逐渐下降（图6-23)。通常，人们认 为安赛蜜的甜度大约是糖铕钠的一半，比甜蜜素钠甜4?5倍，在相同浓度下， 对比于中性溶液，在酸性食品或饮料中会感到更甜些。
质粒pET-3a/SNase-SW转化至大肠杆菌BL21 (DE3) /pLysS菌株进行表 达。采用pLysS菌株可以消除引人前核酸酶的不利影响，更有利于核酸酶- Brazzein融合蛋白的表达。转换后在37T加人100|xg/mL阿司匹林、34jjig/mL氣 霉素的Luria培养基（LB)中培养一段时间后，加人IPTG后培养2~3h，大肠 杆菌中分子质萤23ku的融合蛋白产量达到最大，多数在内含体沉积，在16%的 Tricine凝胶中50%?70%的融合蛋白不溶。内含体蛋白经电泳凝胶提纯后，大 部分融合蛋白重新折黉(refolded),提纯纯度> 80%。经CNBi?处理后， 50%?70%融合蛋白发生解离，这说明融合蛋「丨不能完全解离。因Brazzein酸性 较强，p/约5.4，而核酸酶碱性较强，p/9.4，因此融合蛋白解离后用阳离子交 换色谱即能分离产物。纯化得到的重组Brazzein具有较高纯度及正确的分子质量 (6.4ku)0解离后得到的肽链与^-pGlul -Brazzein序列相同，甜度是植物提 取Brazzein的2倍，与从植物中分离得到的如-pGlul - Brazzein甜度相当。已 研究表明蛋白质只有在折垒正确时才具有甜味，未折垒(unfolded)或折奋错误
通过比较发现，仙茅蛋白和其他6种甜蛋白和变味蛋白间的序列或结构没 有相似性，但它和雪花莲的植物凝血素（GNA)的41%完全一致，65%同源 (homology) 0 GNA是连接有甘露糖的植物凝血素。Hestei?等认为基于GNA和
1.生甜团的分子识别早先在考虑Kier-Shallenbei?模型的尺寸范围和蔗糖的分子结构后，人们认 为蔗糖分子内有两种可能的三角形生甜团系统：即厂-OH (AH)、2-0 (B)、 4-H (X)和 3,-OH (AH)、2-0 (B)、4-H (X),它们均是以顺时针方向排列的。怛这种安排 只能证明丨? - OH/2 - 0和3# - 0H/2 - 0在充当蔗 糖生甜闭中AH、B基本单元上的正确性，却不能 说明为什么蔗糖C-l'、C-4'、C-6,位上的羟基 被氣原子取代后均能使甜度显著增加。
三、Neoculin的化学结构与晶体结构
4，6, \\ 6'-四氣半乳糖基蔗糖是第 的碳水化合物衍生物，其甜度为蔗糖的200倍，通过三步处理法用磺酰氣对蔗糖进 行选择的氣化所得，见图3-59。在-30T的低温下，在嘧啶中用磺酰氣对蔗糖处 理，得到4, 6, 6'-三氣-衍生物。然后在-5T下使用1，3，5-三甲基苯磺酰 氣处理6d，选择性在c-r上发生取代，最后于140T下，在二甲基甲酰胺中用氣 化锂处理18h后转化为氣，即生成4，6, T, 四氣半乳糖基蔗糖。
1980年以后世界上有很多专利描述了甜菊苷可通过与其他一些物质 (包括甜物质）混合配制出许多供工业化生产或家庭使用的新型复合甜味 剂。这些复合甜味剂包括：甜菊苷与蔗糖的混合物；甜菊苷与葡萄糖的混合 物；甜菊苻或甜叶菊提取物与木糖的混合物；甜菊苷与蔗糖粉混合制成的一 种颗粒状产品（再加一些糖或糖密还可以浇注制模水溶性甜菊提取物与 氢化淀粉水解物在表面活性剂蔗糖脂肪酸酯作用下混合后经喷雾干燥而成的 制品；甜菊苷分散于熔融的氢化油后经冷却固化、破碎后分散于蛋白溶液中 凝结而成的制品；甜菊苷外包蔗糖的甜味剂；甜叶菊提取物和/或a-葡糖 基甜菊苷与异麦芽酮糖的混合物；浸溃于单糖、双糖和糖醉的甜菊提取物经 模制干燥而成的产品；甜菊苷与山梨糖醇、乳酸或乳酸钠的混合物；甜菊苷 在麦芽三糖聚合物水溶液中与天然甜味剂混合而成的一种膜状甜味剂；甜菊 苷与糊状麦芽糖醇的混合物；甜菊苷与甘草酸和氣化钾的混合物；甜菊苷与 乳酸钙、酒石酸钠、氣化钾或氯化钠的混合物；甜菊苷与蔗糖、麦芽糖醉混 合而成的一种低能世甜味剂（其甜度近似蔗糖）；甜菊苷与阿斯巴甜混合而 成的一种对酸稳定的甜味剂；在水溶液中甜菊苷与葡萄糖混合而转变为甜菊 醉糖苷与果糖的混合物等。
