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注:①根据总残留》计算;
(二)甘草甜素的毒性作用甘草和甘草甜素属于天然品,在美国被列入GRAS (公认的安全物质),我 国的传统医学认为它还有解毒保肝的作用。对于纯净的甘草甜素,试验测得其半 数致死量U^-SOSrng/kg (小鼠,腹腔),但已有几项研究报道了大剂量甘草和 甘草甜素的副作用。如在一项研究中发现一妇女每天摄取甘草30 ~40g,持续9 个月后出现肌红蛋白尿病变,检测发现其血淸钾浓度仅有而氣浓 度却髙达68imn0l/L。后来,通过静脉输注补充氣化钾,状况大有改观。还有这 样一篇报道,一个70岁的妇女将甘草作为泻药服用2 ~3年,她每天摄人 94 ~ 141 mg甘草酸的钙和钾盐,检查发现其血淸中的钾浓度仅有l.llmmol/L,心 电图检查发现她患有严重的血钾过少病变(Hypokakemia)。通过静脉注射输人 钾和螺幽内酯才使病情有所缓解,作者认为她患有的严重血钾过少病变归因于其 对甘草不正常的过敏反应。
由于奇异果素的糖蛋白在果实中的含萤很低,它本身对温度和pH的变化又 很敏感,这就给分离与提纯带来很大的困难。早期报道的提取工艺由于残留有蛋 白酶活性,所以得率很低。其他方法则要求使用复杂的溶剂系统以及精细的纯化 步骤,即使这样,每吨浆果最多只可提纯出200mg左右的奇异果素。较大规模 提取时,lkg浆果通常只能获得50mg的产品。奇异果素本身对热及pH很敏感, 在低于PH3或高于PH12的室温环境下会失去活性。然而l(XVg的奇异果素就足 够提供持续延绵的增甜效果。实际应用时,1kg的浆果可提供数倍重虽蔗糖的 甜味。
滴加7.40mL (0. O53mol)三乙胺,约lOmin加完,继续搅拌lh,得无色透明溶
简单的疏水D-氨基酸和合成二肽(如阿斯巴甜)就可以激活甜味受体。 所有这些分子,如谷氨酸,都有一个相同的氨基酸结构成分——这一结构成分由 羧基及其相邻的氨基组成u Morini等猜测,受体T1R2-T1R3的活性位点应保留 了所有这些必要特征,否则就不能与这一结构成分结合了。换句话说,在由 mGluRl推测T1R2-T1R3的结构时,位于mGluRl空穴壁上的那些结合由竣基 及其相邻的氨基组成的结构成分的极性残基应当高度保留。事实也证明, mGluRl中那些直接和由竣基及其相邻的氨基组成的结构成分发生相互作用的残 基确实完好地保留了下来。相反,研究人员估计,空穴其他部分的残基,即 mGluRl中那些结合谷氨酸侧链的残基,可能在T1R2-T1R3中由极性转为非极 性。Morini等通过对四个模型的研究,发现结合谷氨酸的由羧基及其相邻的氨基 组成的结构成分的残基在所有原体中都完好保留,而mGluRl中联结谷氨酸盐侧 链的残基则变成极性更弱或不带电的残基。
近年來日本的Kirin公司已将莫奈林表达于产脘假丝酵母(C.u/i7/5),这在 莫奈林的开发上已跨出重大的一步。与此同时,美国FDA已批准产脘假丝酵母 (C. utUis)为“公认的安全物质”(GRAS)。这一切将使莫奈林的研究开发和商 业推广获得新的转机。
(1)以环己胺和氨基磺酸钠为原料
目前尝试的各种提髙G-6-a得率的方法,都未能获得成功。例如,在巨 大芽孢杆菌培养基中添加适萤的乙酸钠,但得率仍和没有添加时一样。又考虑到 巨大芽孢杆菌能产生维生素B,2,而维生素Bl2包含乙酰基并能被添加到培养基中 的Co2 +所刺激,因此推测Co2+也能刺激巨大芽孢杆菌分泌出G-6-a,但在培 养基中加入Co2‘并没有观察到G-6-a的增长。此外,调节培养基的氧浓度、 pH和氮含量等措施,对提髙G-6-a得率也没有什么效果。
即成糖精钠盐,或与Ca (0H)2反应生成糖精钙。
最初分离出马槟榔I和II两种组分,Liu等人进一步分离纯化,发现它有5 种同工蛋白,分别为马槟榔I、1-1、n、10和IV,原来所指的马槟榔1包括 了马槟榔丨、丨-1、in和iv。其中马槟榔n的热稳定性最高,人们对它的研究 也最多,在80T至少可保持48h甜味不被破坏,而其他同系物在80*C保持0.5h, 甜味即丧失,因而马槟榔U具有较高的开发价值。马槟榔的热稳定性(及由此 决定的甜味特性)与其他甜蛋白有较大不同,与某个氨基酸组成有关。如有研 究认为不同马槟榔类似物热稳定性的差别是由于B链47位上是精氨酸(热稳定 型)还是谷氨酸(热不稳定型)。
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