土默特左旗乳糖醇
(一）急性毒性试验
当研究一类蛋白质的共同功能的起源时，研究人员一般都是通过比较序列 和/或三维结构来寻找这类蛋白质成员的对应部分。然而，人们至今仍未在莫奈 林、嗦吗甜、Brazzein、马槟榔、奇异果素和Curculin中发现序列同源性。通过 Clustal X得出的双序列比对结果表明，莫奈林和其他甜蛋白（嗦吗甜、Brazzein、 马槟榔、奇异果素和Curculin)的相同残基百分比为：莫奈林和奇异果素之间 23% ,莫奈林和Curculin之间仅为7%。如果把鸡蛋淸溶菌酶也考虑进去，那么， 所得的结果[图1-30 (1)]是这些蛋白质完全不存在对应性（mis-alignment): 仅有3个部位具有少许同源性。即使把序列比对仅局限在三种最甜的蛋白（莫 奈林、Brazzein、嗦吗甜>，也只能发现2个相同部位和12个具有同源性的部位 [图 1-30 (2)]。图1-30 甜味蛋白的序列比对 (I)典奈林、嗦叫甜、BraHein、4槟梅、奇异果家、仙茅蛋甶和鸡蛋淸溶菌酶的比对 <2)奂奈林、嗦吗甜和Bra/zrin的比对比较现有的甜蛋白（莫奈林、嗦吗甜和Brazzein)的三维结构，也儿乎没宥 发现它们之间存在任何的相似性。Brazzein、莫奈林和嗦吗甜三维结构的惟一共 同点是二级结构的一个小K域，即符合甜味指要求的办-折登发夹结构，这一结 构具有已在小分子甜味剂所确定的生甜团。
(一）产物结构和甜味特性用芦-呋喃果糖苷酶在甜菊双糖A苷的丨9位所连葡糖基上引人果糖基后， 甜味特性的变化见表4 - 10。如用细杆菌（—m sp. H - 1 )的芦-呋喃 果糖苷酶在PH6.5, 40弋条件催化蔗糖和甜菊双糖A苷（RA)反应2h，得到果 糖基甜菊双糖A昔（RA-F),果糖基连接在19-0-召-葡糖基的6-0H上
甜菊作浓j?/(g/L>
当S -6 - a达到最大得率时，可通过DEAE -纤维素树脂除去果糖转移酶， 或通过热变性（65弋、lOmin)作用来终止反应。最后，S-6-a经高效液相色 语（固定相为Cl8柱，流动相为水）的分离提纯作用可以获得纯度大于85%的
Rubusoside还带有明显的苦后味。有人利用巨大芽孢杆菌 (BacUlus megaterium)产生的环糊精葡萄糖基转移酶对 Rubusoside进行改性处理，得到数种同型物的甜度更高，
图6 -丨4 连续式Maumee糖括合成途径
通过研究不同预培养时间下，CYH抗性细胞和活细胞的增加量来确定最优 预培养时间。随着培养时间增加，活细胞和CYH抗性细胞增加，但CYH抗性细 胞的增加速率比活细胞快，转化体和活细胞数之比在6h内一直增加，但更长的 培养时间对转化体与活细胞数的比例影响不明显（图5-17)，这表明6h内CYH 抗性基因已完全表达了。
(五）酰基供体和酜基受体的比例对反应产率的影响保持/V-C3Z-L-Asp (OEt) OEt 0.5mmol 不变，改变 D-AUNH2 的谊， 得到不同比例的酰基受体D-AUNH2和酰基供体W-CBZ-L-ASP (OEt) OEt。 如图2-68所示，反应产率随宥酰基受体/酰基供体比值的增大而增加直到其比 值为1,在其比值大于1以后，酰基受体/酰基供体的比值增大不会提高反应的 产率。图2 - 68 不间酰箪受体和酰基供体摩尔比对反应产申的影响 注：丨2%的水、9%的DMS0和丨8%的MEA为辅助因子，丨5%的a -胰凝乳蛋白期.反应8h,
四、Neoculin的甜味与变味机理
