罗湖区异麦芽酮糖
甜菊苷是一种有中国特色的天然甜味剂，甜度是蔗糖的150?200倍。其最 大的问题在于甜味不正，带有明显的苦涩味，甜味刺激缓慢，味觉延绵。一般的 甜菊苷只有90% ~92%的纯度，由于成分的不确定性，导致难以进行良好生产 规范（GMP)。甜菊苷的后苦味使其应用受到限制，通过酶法改性，能够使其的 甜味特性得以改善。
③每人每天摄入的蔗糖平均量是100g;
成肽时的最主要特征。
以紫苏亭为原料进一步衍生制得肟化物SRI Oxime V (图6 -27〉，甜度是蔗 糖的450倍，有很大的发展前途。相比于母体化合物，SKI Oxime V的水溶性得
转糖苷反应产物的影
一水-令乙?
三、利用生物技术法生产Brazzein
质粒pET-3a/SNase-SW转化至大肠杆菌BL21 (DE3) /pLysS菌株进行表 达。采用pLysS菌株可以消除引人前核酸酶的不利影响，更有利于核酸酶- Brazzein融合蛋白的表达。转换后在37T加人100|xg/mL阿司匹林、34jjig/mL氣 霉素的Luria培养基（LB)中培养一段时间后，加人IPTG后培养2~3h，大肠 杆菌中分子质萤23ku的融合蛋白产量达到最大，多数在内含体沉积，在16%的 Tricine凝胶中50%?70%的融合蛋白不溶。内含体蛋白经电泳凝胶提纯后，大 部分融合蛋白重新折黉(refolded),提纯纯度> 80%。经CNBi?处理后， 50%?70%融合蛋白发生解离，这说明融合蛋「丨不能完全解离。因Brazzein酸性 较强，p/约5.4，而核酸酶碱性较强，p/9.4，因此融合蛋白解离后用阳离子交 换色谱即能分离产物。纯化得到的重组Brazzein具有较高纯度及正确的分子质量 (6.4ku)0解离后得到的肽链与^-pGlul -Brazzein序列相同，甜度是植物提 取Brazzein的2倍，与从植物中分离得到的如-pGlul - Brazzein甜度相当。已 研究表明蛋白质只有在折垒正确时才具有甜味，未折垒(unfolded)或折奋错误
Akiko Shimizu - Ibuka首次对Neoculin的三级结构进行了详细的描述。八 条多肽链A至H组成了 AB、CD、EF和GH四个结晶学独立的异型二聚体 (in the asymmelric unit)。肽链 A、C、E 和 G 与 NAS 相对应，肽链 B、D、F 和H与NBS相对应。异型二聚体AB的总体结构如图5-26 (1)所示。亚 基NAS和NBS的结构非常相似。每一原体由3个排列于三棱柱表面的4链 召-折叠组成，并于结构中央附有一 pseudo three - fold axis (處拟三次轴）。 当中的三个折钱都是反平行的，第丨2个/3-链来自于另一个亚基[图5-26
