满洲里市爱德万甜
Lelj等人结合使用NMK与分子力学计算法探讨阿斯巴甜构象优先性。首先 通过分析CHCH2碎片ABX质子的NMR偶合常数来分析旁链的构象优先性，然 后计弊出每个参差构象（staggered confonnalions,图2 -82)的相对密度。天冬 氨酰残基的参差构象（Di ~Db)与苯丙氨酸残基的参差构象（Fi ~Fn)是相 反的，天冬氨酰残基偏于Dd构象。另外两个参差构象，有一个（I),)携带反 式的NH/和COf基团，不能同时与甜受体形成氢键；另一个（Db)则充满了 大取代基。对于苯丙氨酸残基来说，根据苯基团优先偏于甲基酯而不是天冬氨酰 基团的立体直观观察事实，可推定它优先存在的构象是F:而不是FDt5 NMR分 析表明，苯丙氨酸C (/3) H2质子反向连接于该优先存在的构象上。还有一个参 差构象Fb，则充满大取代基。
0.3g/L0以重组酵母GS115/PPIC9M/PPIC3.5kV为出发菌株，通过摇瓶水平发酵 条件优化，高甜度莫奈林的分泌表达量进一步由0.3g/L提髙到了 0.5g/L。在 30L发酵罐上采取分批补料的方式实现了重组酵母GS115/pP丨C9M/PPIC3. 5kV的 高密度发酵，高甜度萸奈林分泌表达量达2g/L。而且表达的髙甜度萸奈林分泌 到胞外，无需破碎细胞提取。诙方法提供了一条产量高、分离纯化简便、可低成 本大规模生产高甜度英奈林的新途径，为实现髙甜度莫奈林的产业化和vgb基因 在毕赤酵母髙密度发酵中的广泛应用萸定了基础。
上述大部分试验是在20世纪60 ~ 70年代进行的。1985 ~ 1986年间，荷兰 TNO - CIVO毒理与营养学研究所对新橙皮苷二氢查耳酮重新进行了一次彻底的 亚慢性（13周）小鼠毒理实验。在该研究中，雄、雌性Wistar小鼠每20只为一 组，在91d的喂养期间，新橙皮苷二氢查耳酮D的添加剂量分别为0%、0.2%、 1.0%和5.0%。结果只在5%剂萤组出现一些变化，诸如出现着边（炎症初期 时，白细胞黏着于血管壁）、体重与饲料采食萤发生变化，盲肠增大，以及临床 化学参数发生轻微变化等。这些现象的出现，说明化合物n只表现出很轻微的毐 性作用。其余的剂量组，未发现任何异常。所有剂量组在动物眼科、血液学和组 织病理学方面，未出现任何异常。这个试验表明，对中等剂量组，换算成每天每 千克体重的剂量是750mg，是安全的。根据这个以及上述早期的试验结果，欧共 体食品科学委员会于1987年承认新橙皮苷二氢查耳酮的食用安全性，并提出其 最大的ADI值为5mg/kg。对于大多数的食品用途来说，这个ADI值是足够的。
198丨年，FDA在广泛审查了科学家们的大规模安全资料之后，FDA委员 Arthur Hull Hayer对阿斯巴甜的食品添加剂地位予以认可。Hayer指出，从曰本来 的一项关于脑肿瘤的科学研究资料，坚定了他决定批准的信心。PBO丨主席后来 写信给Hayer表明，日本的研究數据坚定了专家们给予阿斯巴甜一个“无条件的 批准”的立场。
图5 - 1所示为嗦吗甜分子三级结构示意图。
蔗糖的能量值为16.7kJ/g,阿斯巴甜为16.7kJ/g，纽甜<1.2kJ/g，根据这 些数值可以很容易地计算出，含100g/L蔗糖的饮料能虽为1700kJ/g，含 525mg/L阿斯巴甜的饮料为8.92kJ/g，含17mg/L纽甜的饮料则小于0. 02kJ/g。 也就是说，用阿斯巴甜的饮料所含能量比用蔗糖的低0.52% ,而用纽甜的饮料 所含能S比用阿斯巴甜的至少低0.22%，比用蔗糖的至少低0.001%。从实际效 果看，可认为纽甜是无能量的甜味剂。
给试验动物的膳食中添加的纽甜浓度超过0.05%?3. 50%的范围时，食物的 可口性就会降低，从而导致动物拒绝进食或食后溢出，这与所给的动物每千克体 重的纽甜剂量无关，而与膳食中纽甜的浓度有关。例如在13周的试验中，因为 随着动物体重的增加，膳食中纽甜的浓度要不断增加以维持试验要求的以千克体 重为基础的剂萤，所以当纽甜在睛食中的浓度从50g/kg (膳食的5%)降到 35g/kg (膳食的3.5%)时，狗实际上消耗了更多的纽甜。用纽甜对年幼大鼠 (1~13周）所进行的1年或2年的试验，没有发现与纽甜有关的食物消耗或食 物转换效率的改变，因为生长期的年幼动物当其生长的生理需要战胜了可口性差 的膳食时，它就会“饥不择食”。
②蔗糖C-2位上平伏的a-羟基是甜味所必需的，因为6，1、6,-三氣- 6，丨\ 6,-三脱氧蔗糖的甜度是蔗糖的100倍，而其C-2位上的羟基被氣取代 并经构型转化后生成的2，6,丨\ 6'-四氣-2，6，丨、6^-四脱氧甘露蔗糖却 像喹啉一样苦。
Seville橘子产量较小，因此大量的新橙皮苷最好由柚苷（IV)合成而得， 其反应过程见图4-32。根皮乙酰苯-4'新橙皮苷（VI)，是个很有用的中 间产物，可用来替代黄烷酮及其衍生物。在充满氮气的容器中加热柚苷（17g)、 水（175mL)和氢氧化钾（50g)混合物，回流3.5h,冷却后中和之，生成淡黄 色沉淀物（\U)，再用水结晶两次可得到无色针状晶体（熔点164 ~ 1651,产景 6. 6g)0若用丙酮结晶，则可得熔点为256?257弋的晶体。图4-32 从柚苷向新橙皮苷的化学转化图
(一）阿力甜的化学结构阿力甜（Alitame)的化学结构如图2-58所示，它由L-天冬氨酰、D-丙 氨酸和C -端酰胺三部分组成。C -端的酰胺是由2, 2, 4, 4 -四甲 基-thienanyl-胺转化而成，它是形成阿力甜髙甜度特性的关键因素。在研究过 程的I.-天冬氨酰-D -丙氨酸-酰胺同型物中，分析认为对髙甜度特性有益的 结构特征：
