永善县罗汉果苷
[NHSO, ]: ? Ca + 2HjN—+ 2H20
由表4 -25可知,M. vinacea的a -半乳糖苷酶在反应起始阶段主要形成 RGal-la。RU为0. 1 mol/L时,随棉子糖浓度增加,RGal - la和RGal - 2的量 随之增加,但转化率(RGa卜U和RGa丨-2的量与所加棉子糖的童之比)随棉 子糖浓度增加而下降。RU为0.2mol/L时,0. 棉子糖转化得到的
2.非均匀酶催化反应体系的产物分离
发酵完成后,为了从去除干物质的培养基上清液中有效地提取出G -6 - a, 人们试验了多种溶剂,包括甲醇、乙醇、丙酮、乙酸乙酯和1 -丙醇等。其中, 甲醇是G-6-a最有效的溶剂,但它同时也会溶解一些葡萄糖,因此要得到纯 净的G-6-a,还必须利用色谱进行进一步分离。以硅胶为固定相,用丙酮对甲 醇提取液进行洗脱可以从中分离出葡萄糖和G -6 - a两个成分并得到纯度为 80% ~85% 的 G-6-a。
Kohimira等通过固相合成法,分别人工合成莫奈林的A链、B链,然后将二 者组装成有甜味活性的莫奈林,其甜度是蔗糖的4000倍。同时,在不改变莫奈 林的天然构象的条件下,对A链和B链上具有竣基的氨基酸残基进行替换,合 成了一些奐奈林类似物,与人工合成的莫奈林的甜度相比较,对莫奈林的功能进 行了一系列的研究。结果发现:[Atm^GlnWAs,] - [ ASN^Gln ^0]-莫奈 林、[AsnW9Gln _]-莫奈林的甜度分别是蔗糖的550倍、4000倍。这说明:莫奈 林A链上第22、26位的Asp和第25位的Glu均不参与甜味受体的结合,但被替换 后能造成甜度的下降。[AsnAUS]-、[Asn^], [Gln^25] -、[ Asn"26 ]-莫奈林的甜 度分別是蔗糖的7500倍、750倍、2500倍和5500倍。
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用固定化酶催化合成肽的反应条件优化要考虑3个因素:间定化酶的稳定 性、反应时间和平衡得率。图2-25 (1)所示为a = 15时,固定在Amberlite XAD-7的嗜热菌蛋白酶稳定性、平衡得率、相对起始反应速率。裁体内部最优 pH为5~6。当PH <5时,起始反应速率低且酶不稳定;pH >6时,平衡得率急 剧下降。在大多数情况下,多孔载体内的pH只由底物和产物的缓冲作用决定, 用酸或碱中和的方法很难调节。这是阂定化酶以非水溶性有机溶剂为介质催化合]’可增加酶的稳定 性,但得率仍会逐渐下降。在CSTR整个反应器中,底物和产物浓度各处均 相等。
A、B两种分子的结构总特征很相似。新橙皮苷二氢查耳酮分子整体呈“J” 字母形状,办-新橙皮糖基位于“r字母的弯曲部位,橙皮素二氢查耳酮的糖 苷配基位于“厂字母的直线部位。一些早期的研究认为二氢查耳酮的“活性” 构象(如带有甜味的)是:糖苷配基呈弯曲或扭曲状,两个芳族环的平面大约 呈90°。假如上述固体状态的构象分析结果可引申至液体状态下的分子构象,那 就说明这些早期的分析结果不对。
{四)化学惰性与阿斯巴甜的伯氨基相反,纽甜的仲氨基不能通过缩合反应与还原糖和醛基 衍生物反应。纽甜对这些化合物的惰性使得它:①可与多种还原性羰基化合物,如葡萄糖、果糖、高果糖浆、乳糖、麦芽 糖等,共同使用而不会产生美拉德反应。②可与多种含醛基的香料或风味物质,如图2-4丨所示的香兰素、乙基 香兰素(香草)、肉桂醛(肉桂)、苯甲酸(樓桃和苦杏仁)、柠樣醛(柠 檬)等,共同使用而不发生Schiff碱合成反应(K—?CHO + hN—APM — R— CH =NH—APM + H20)o醛基化合物与阿斯巴甜未取代的氨基之间,会产 生所不希望的SchHT碱合成反应,而纽甜中/V-取代的氨基则不会发生这种 反应。
图2 -49和图2 - 2分别为纽甜和阿斯巴甜在人体的代谢途径。纽甜进人人 体后,约有一半以3,3-二甲基丁基天冬氨酰苯丙氨酸(DMB-Asp-Phe)的 形式由粪便排出体外;另一半被原封不动地吸收,然后再进一步水解成DMB- Asp-Phe和甲醇。这其中的大部分DMB-Asp-Phe (半衰期为2h)是通过尿排 出,而不会在任何组织中有较多的残留;另外只有一小部分被机体代谢,通过氣 化3,3 - 二甲基丁基部分形成3, 3-二甲基丁酸,作为人体的一种肉碱醋 (Carnitine ester,少于纽甜摄人量的5% )由尿液排出。值得注意的是,阿斯巴 甜的代谢分解与纽甜有很大不同。阿斯巴甜在肠道的内腔或黏膜细胞中就分解成 3种成分^天冬氨酸(Asp)、苯内氨酸(Phe)和甲醉。这些成分被吸收,进 入人体静脉循环,进人氨基酸代谢循环中。因此可认为,阿斯巴甜被完全代谢吸 收,而超过90%的纽甜都是通过排泄物排出体外的。图2-49 纽甜的代谢途径 (1)主代謝途径(>90%)(纽甜转化成其?水解衍生物DMB-A卬-Phe,由粪便或屎液排出) (2)次代谢途椏(< 10% ) [DMB-Asp-Phe的3, 3-二甲幕丁基部分 被氣化成3. 3-二中基丁酸.作为肉碱? ( <5% )由尿液排出]
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