天涯区爱德万甜
为生产分泌嗦吗甜，构建了四个表达质粒pBKThb、pCKThb、pGDTh、 pGPThh (图5-6)。所有质粒均含有信号序列和编码的B2酯酶氨
过在60弋保持lOmin，然后在4t、pH4.5条件下保持lh,可得接近单一组分的 莫奈林（经SDS - PAGE测定）。通过离子交换柱可进一步纯化，得率约为 100mg/10g湿酵母（700mg可溶蛋白〉。提纯得到的萸奈林与天然莫奈林甜度一 样，阈值丨网，通过CD光谱分析比较重组莫奈林和天然莫奈林的二级结构单 元，因此可以预料两者必然有相同的三级结构。
七、利用泡盛曲霉基因工程法生产嗦吗甜
以2# (kg-d)浓度水平喂养怀孕小鼠6~15d，发现嗦吗甜没有致畸性。活 体外微生物基因诱变试验表明它没荷诱变活性。因为嗦吗甜是可溶性蛋白，有人W 此推测它在肠道内可能具有免疫活性，但经口试验没检测到它的任何免疫活性。
二、阿斯巴甜的甜味特性一）阿斯巴甜的甜度阿斯巴甜具有淸爽、类似蔗糖一样的甜感 涩味或金属后味，这是它的一个很1[要的优点 甜味剂的口感对比，图2 - 16所示为阿斯巴甜与蔗糖甜味特性的比较W2-15不同甜味剂口感对比 (甜味等用于丨0%的蔗糙水滚液>入口初有苦粗味图2-16阿斯巴甜与蔗糖的甜味特性对比 ——丨0%脒糖水溶液 SMmVkg阿斯巴甜在食品和软饮料中，通常情况下阿斯巴甜的甜度是蔗糖的180 ~220倍（表 2-4)。总的说来，阿斯巴甜的相对甜度与对照物蔗糖浓度呈负相关，并随不同 的香味系统、pH、品尝温度和蔗糖或其他糖的浓度而发生变化。蔗糖浓度与等甜度下W斯巴甜浓度的比值。
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最近，研究人员还发现了一种NAS的同种异型物一NAS-2。仙茅蛋白2 的cDNA已克隆，其核苷酸序列也被测定。尽管，仙茅蛋白2的推测氨基酸序列 与NAS的相同，研究人员发现两者的核苷酸仍存在一个不同之处。Maiko Suzuki 等尝试了在￡：.co/i中表达重组仙茅蛋白1 (过去被认为是Cimnilin)和仙茅蛋白 2。仙茅蛋白1和仙茅蛋白2分别在E. coli中表达，然后用氧化重折叠方法重新 组合，从而获得仙茅蛋白的二聚体。可是，无论是仙茅蛋白1的同型二聚体 (仙茅蛋白丨-1)还是CurcuUd的同型二聚体（仙茅蛋白2-2),都未能引起 甜味，也未能起味道修饰作用。
4'-氣-4'-脱氧-三氣蔗糖的C-3'和C-4'的构象颠倒，将降低甜度。因 此，4-氣-4-脱氧-?-D-P比喃半乳糖_1, 4, 6_三氣-1, 4, 6-三脱氧 -冷-D-山梨呋喃糖的甜度（200倍）只有果糖苷异构体（2200倍）的1/10。 分子间糖苷键C-l -0-C-2澌近的刺激分子的构象柔韧性，使得异构化；T- OH作为AHs参与氢键形成，而4'-C1则远离受体部位（X!)。甜味分子与受体 蛋内的相互作用[3f-OH (AHs) /2-0 (Bs), l'-Cl (X:)和4-C1 (X：)], 只存在两个疏水结合部位，见图3-56，而果糖苷异构体含有四个疏水结合 部位。
在多数情况下，上述的开环反应均可定量进行，因此，从黄烷酮到査耳酮冉 到二氢查邛酮的得率一般都比较高。如表4-17所示，用来生产甜味剂I、n和in (结构式见图4-27)的黄烷酮来源于柑橘，它们往往是柑橘皮的主要成分。有两 种黄烷酮（IV和V)为包含有芦-新橙皮苷（2-0-a-LP比喃鼠李糖基-卢-D- 吡喃葡萄糖）的糖苷，还有-种黄烷酮（VI)包含芸畚二糖（6-0-a-L-Ptt： 喃鼠李糖基-沒-D-吡喃葡萄糖）（结构式见图4-28)。如果酚类或黄酮类糖背的糖 基是卢-新橙皮糖或/3-D-葡萄糖的话，则它们为有味物质（苦味、甜味或苦甜
分别用M. vuiacea、A reflexa、大肠杆菌和咖啡豆的《 -半乳糖苷酶催化棉子 糖和甜叶悬钩子苷的混合体系，产物情况见表4-27。半乳糖苷转化物的里随反 应时间增加而增加。大肠杆菌、咖啡豆和的《-半乳糖苷酶均产生 RGal-la, RGal-lb,但前二者的转化量小。
