海口市乳糖
Kondo等人曾尝试构建一 SCM质粒并在C— idilis中生产SCM。他们把 SCM基因插入由产脘假丝酵母(C. utUis)克隆来的GAP基因的启动子和终止子 片段之间。通过这种方式，他们获得了高产虽的SCM，表达水平高于总可溶性 蛋白的50%。他们还尝试克降带S. cerevisiae GAPDH启动子的SCM基因用来生 产SCM。然而，所得的产最水平很低，仅为总可溶性蛋白的5%左右。美国一专 利公开了利用P. pastoris生产SCM的方法。首先将合成的SCM基因克隆于含有 S. cerevisiae a -因子分泌信号和GAPDH启动子的PGAPZa -载体，然后将构建的 质粒转化成P.P^tori5GS115，最后通过菌株对Zcocin的阻抗性，对转化株进行 筛选。观察发现所分泌的.1：组英奈林为一条12kji的带。SDS - PAGE分析表明， 通过该方法可获得约10g/L的SCM。这些SCM经纯化后可引起甜味。
本节主要介绍采用嗜热繭蛋酶催化合成阿斯巴甜前体的研究。(2)内肽酶(Endopeptidas) 可将W -苯甲酰-L -天冬氨酸-a -甲酯与 L -苯丙氨酸甲酯缩合生成带苯甲酰基的a - Asp - Phe0Meo(3)木瓜蛋白酶在乙酸乙酯溶液中将苄氧羰基-L-天冬氨酸与苯丙氨酸 中酯缩合生成带苄氧羰基的阿斯巴甜。木瓜蛋内酶甚至可用外消旋的D, L-苯 丙氨酸甲酯起反应，而只生成L-型产物。(4)嗜热脂肪芽孢杆菌(BaciUus stearothermophUwO的中性蛋白酶可将苄 氧羰基-L-天冬氨酸与苯丙氨酸甲酯盐酸化合物缩合生成带保护基的阿斯 巴甜。(5)金黄色葡萄球菌(^taPhylococc似aurcwO的蛋白酶可用不带保护基的 L -天冬氨酸-? -甲醋或a -酸氣与L -苯丙氨酸甲酯缩合生成阿斯巴甜。
“已收集到的证据已对某些特殊情况作了补充，这些就现代标准来说已是足 够的，即使再进行统一的标准化试验，也不大可能发现甜蜜素有毒”。
四、纽甜的生产技术纽甜可以由阿斯巴甜（APM)与3, 3 _ 二甲基丁醛（简写为DMBA)经催 化加氢还原烷基化反应而制得；也可以将阿斯巴甜的前体物与3, 3-二甲 基丁醛经过类似的反应后氨解得到。由于阿斯巴甜供应充足，价格稳定，故一般 采用第一种方法合成。
(4)乙酰乙跣胺-氟硫酰氟法。
由于微生物表达系统在产生功能蛋白方面的不理想，科学家们逐渐将注意力 集中在转基因植物的研究上。在马铃蕃中的表达成功启示可以将甜味蛋由基因转 进其他畜用或人用经济作物中表达，从而增加其食用价值。同时由于甜味蛋白的 表达fi仍然偏低，培养出高效表达的转基因植株仍是一大难题。
FSte浓度的模型H?算结果和实验结果均非常符合；但蔗糖浓度的模型计算值比实 验值卜降慢，G、F浓度计算值比实验值增加慢，因此根据该模型计算的蔗糖水 解速率比实验值小。这是因为蔗糖水解参数是根据不加人甜菊苷时蔗糖水解的试 验结果估计，而通常反应体系中加人表面活性剂后，糖类如纤维素、木糖的水解 速率会增大。甜菊苷有亲水和亲油基团，其表面活性加快了蔗糖水解速率的增 加，而计算时没有考虑甜菊苷对蔗糖水解常数的影响，因此加入甜菊苷后，图中 模型拟合曲线不能很正确地反映蔗糖的水解情况，见图4 -25。
这四个T1R2-T1R3异型二聚体，两个为开-开形态的模型，另外两个为复 合的合-开形态。所有这些模型都经Morini等人系统地检验过，并用于识別相 互作用中所有可能的作用部位。lewk的A链为T1R2, B链为T1K3的模型，称 为Aoc-AB，丨ewk的A链为T1R3, B链为T1R2的模型，称为Aoc-BA。
