新城区甜菊糖
构建的pRMll和pUMll中包含细菌质粒序列，因此经Bgl II酶切去除细菌 序列实现线性化后将促进载体在目标部位通过单交换取组（single crossover recombination)进行的整合，分别以质粒pCLRM216和pKMl 1所含的rDNA片段 和质粒pUMl 1所含URA3基因片段作为同源重组整合的目标序列。
液。降温至0T，约15min向瓶内滴加4.20mL (0. 055mol)双乙烯酮，继续反
313-10三氧蔗糖相对于蔗糖的甜度 ■ - PH2. 75 _ o - pH3.1 --A…plf7. 6
(4)乙酰乙跣胺-氟硫酰氟法。
研究者对仙茅蛋白的变味作用机理进行了探讨，认为仙茅蛋白可能与奇异果 素类似，也有两个结合点：一个与甜味接收蛋白的接收点连接，另一个靠近甜味 接收器位点的位点结合。后一个结合作用很强，因此仙茅蛋白一旦与舌头接触， 不易与接收器的膜分离。仙茅蛋白的活力位点微弱地刺激接收器膜上的甜味接受 位点，从而产生较弱的甜味。而唾液中的Ca2+和/或Mg2+抑制了仙茅蛋白对甜 味接受位点的刺激，导致甜味消失。舌头接触水使得唾液中的二价阳离子从舌头 表面去除了，W此仙茅蛋白的甜味冋复。酸引起了甜味接收器膜构型的变化，从 而导致仙茅蛋白活力部位对甜味接收位点的亲和力增强了，因此，酸引起的甜味 更强。也可能酸引起了仙茅蛋白的构型变化，从而增强了亲和力。舌头表面的酸 去除后，使仙茅蛋白的活力部位与甜味接收位点脱离，而仙茅蛋白本身不从接收 器膜脱离。
一般认为嗦吗甜的分子形状、溶剂对嗦吗甜的风味增效特性影响不大，怛有 人认为这方面的影响仍然较大，最明显的例子是柠橡油。往柠檬油中添加嗦吗甜 水溶液使其浓度达到0.5mg/kg，发现其风味增强了两倍。但若添加丨％的嗦吗甜 乙醇液（乙醇浓度20%?60%),柠橡油中的嗦吗甜浓度仍是0.5mg/kg，混合液 JT：藏17h后发现柠檬风味增强了 8倍。同样条件下对咖啡风味来说，原介质中风 味只增强2倍，但在有乙醇存在的介质中，lh后总体风味增强了 4倍。因此， 当往风味较弱的溶液中添加含有乙醉类的有机溶剂的嗦吗甜溶液后发现，溶剂对 嗦吗甜的风味增效特性影响甚大。
阁2 - 79 阿斯巴甜与Suosan的结合体
另外，也可将微生物菌丝体直接加到含底物的反应体系中，进行催化缩合反 应。经研究认为有效的微生物包括：无色杆菌(Achmmabacter)、产碱杆菌 (Alcalicigenes )、扩展杆菌（Brevibacterium )、节杆菌（Arthrobacter)、假丝酵母 (Candida) N 棒状杆菌（Cor)7^e/>oc?erium)、黄杆菌(navobaclerium)、纤维单胞 (W ( Cellulomonas) % 八奋球菌(Sarcina)、假单胞菌(Pseiubmonas)和掷孢酵母 (Sporobolomyces)等。它们的作用底物，除了常用的苯丙氨酸甲酯和带保护基的 天冬氨酸衍生物外，还可直接用2种氨基酸为原料合成阿斯巴甜或其前体化 合物。
图3-47 4-氣-4-脱氧-半乳糖基-蔗糖的合成 (Piv = COCMe,) I RSOjCl, Pyr
(四）酵母嗦吗甜的分析
