阿斯巴甜没有明显的毒性作用，毒性迹象或致癌性。
已通过对致死亡和体内细胞遗传分析来观察阿斯巴甜可能的诱变活性。实验表明阿斯巴甜与细胞的突变频率没有关系，因此不具诱变活性。致畸试验表明，在规定摄取范围内阿斯巴甜对生育力，畸胎出现率，平均怀孕期，生产动物的生命安全及生产动物一胎生下动物的大小和性别分布等没有明显的影响。
阿斯巴甜本身含有DKP数量很少，但在某些贮藏条件下，阿斯巴甜有可能变成DKP，因此人体可能接触的DKP数量不多但数量不一样。DKP的毒性，致畸性，诱变型和药理学实验表明，在0-3g/kg范围内DKP没有直接的毒性效果。
阿斯巴甜的人体试验方面的研究表明，正常人，儿童和青年人对阿斯巴甜有很强的忍受力。实验表明，糖尿病患者和肥胖症患者即使摄入1.8g/d的阿斯巴甜持续21周以上，仍有很强的耐受性。对谷氨酸盐过敏症人也做了类似的研究，没有发现任何不良影响。
