建安区乳糖

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第一节阿斯巴甜
对CGTase催化得到的甜叶悬钩子苷的转糖基衍生物的甜质和结构关系研究 发现,在13-0H相连的葡栅基上进行转糖基化,甜度和甜质有明显改善,而在 19-羧基相连的葡糖基上进行转糖苻反应,则甜味和甜质变差。因此要对甜叶悬 钩子苷进行选择性修饰。
以泡盛曲霉(AspergiUus awamori)为嗦吗甜基W宿主细胞构逑的表达系统, 采用强力霉菌启动子,对2个基因表达盒进行2次转化,并用KEX蛋白水解酶 水解融合蛋白得到嗦吗甜。转化体在优化培养基摇瓶培养得到的产星可达 14mg/L,发酵鎌培养产量约为100mg/L,具备商业化生产的潜力。
低熔点混合物是指反应物按一定比例混合后得到熔点比反应各成分的熔点都 要低的混合物。用这种混合物作为溶剂的反应也称无溶剂反应。2000年,Chuly oung Kim等用无溶剂反应的方法合成阿力甜二肽的衍生物N -苄氧羰基-L -天 冬氨酸乙酯-D-丙氨酰胺(W-CBZ-L-A8P (OEt) - D-AlaNH2),其中 N -苄氡羰基-L -天冬氨酸乙酯-D -丙氨酰胺是通过N -苄氧羰基-L -天冬 氨酸二乙酯(/V-CBZ-L-Asp (OEt) OEt)和 D-丙氨酰胺(D-AlaNH2)在 ? -胰凝乳蛋A酶的催化下缩合而成。Chulyoung Kim等还研究了此低熔点混合物 的特性和最佳反应条件。
由于莫奈林分子中较为稳定的a-螺旋结构含量较少,其完整的三级结构因 而较易受到各种变性剂的迅速破坏。变性的结果导致了三级结构的无序化,分子 甜味随之丧失。但构象上的轻度变化是可以容忍的,并不会导致甜味的完全消 失。用十二烷基硫酸钠或50%乙醇溶液处理,造成货奈林蛋白质变性并失去了 甜味,分子中a-螺旋结构的含量有所增加。但用25%乙醇溶液处理,不会引起 构象和甜味的变化。莫奈林对碱十分敏感,值单独由于喊引起的变性而造成紧密 肽链结构的伸展现象还是可逆的。例如,pHlO.9环境下引起的变性,当用酸调 节至PH3.3时,其三级结构仍可恢复。此时,尽管分子的整体构象并没完全恢 复,但甜味却部分恢复了。
安赛蜜粗品。用等质童的蒸馏水重结晶,即得安塞蜜产品[熔点224 ~ 225弋
(2)只有用含甜蜜素高于丨%的饲料喂养大鼠,才出现体重下降现象。 在喂养小鼠时也发现相同的情况。以4g/kg的甜蜜素钠盐喂狗30(丨或以 1.5g/kg的甜蜜素钠盐与糖精钠以10: 1混合的混合料喂狗2年,没有发现狗 生长受抑制现象。以200mg/ (kg ? d)的甜蜜素钠盐喂雌糇5年以上,也没 影响其生长。
达水平没有区别。但是在rDNAK整合的质粒转化体,在非选择性培养基上 培养50代后,莫奈林产量明显下降,而整合点在UKA3区的质粒的转化体 中没有明显下降,见图5-19。不带萸奈林表达盒的载体一直都保持稳定, 这说明莫奈林的高产可能会导致在rDNA区粮合载体稳定性的显著下降。且 培养50代后,pUMll转化体对CYH (4(Vg/inL)保留抗性的细胞数占总细 胞数的80% -100%, pCLRM216和pRM丨丨转化体为0% ~ 30%。这些结果 表明URA3区是在C. utilis中最优多拷贝整合点。URA3栽体除能维持载体序 列稳定外,它还在转化前去除了细菌序列,这对于食品工业蛋白质生产是很 有益的。

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