芦溪县D-木糖
Brazzein在植物甜蛋白中分子质虽最小,分子质萤约为6473u, p/为5。它 具有良好的水溶性,在水中的溶解度在50mg/mL以上,甜度是等质虽蔗糖的 2000倍。其结构相对简单并具有良好的热稳定性和PH稳定性,在较宽的1^和 温度范围内保持稳定,在80T保持4h甜度没有减弱,在85弋仍保持折叠形式, 在髙pH的溶液中仍保持甜味活性。它良好的热稳定性也许应归因于分子内的4 个二硫键。由于这些特性使其在食品添加剂中具有巨大的应用潜力,并成为研究 甜味蛋白分子结构、生化特性及甜味机制的理想蛋白模型。
两种方法均表明,在29位天冬氨酸的突变(以丙氨酸、赖氨酸或天冬酰氨 替代29位的天冬氨酸)都会生成甜度显著比Bimzein强的分子,而在30或33 位的突变(以天冬氨酸代替30位的赖氨酸或以丙氨酸代替33位的精氨酸)则 会使分子的甜味丧失。在办折叠K域也有相同的情形,当以赖氨酸代替41位的 谷氨酸时,分子甜度最髙,而当以丙氧酸代替43位的精氨酸时,也会导致甜味 丧失。这些结果表明,电荷对产生甜味有重要作用,相对来说,侧链的长度则不 那么f:要。同时,还发现N端和C端的结构对Brazzein的甜度也有很大影响。另 外一个重大发现是,人体和猴试验的结果之间存在者密切的联系。这就给假设 ——猴子S纤维的记录结果可用来估算在人体中同种甜味剂可呈现的甜度,提供 了有力的证明。
转化菌株TB2bl -44中已含有B2作启动子的表达盒,再经质粒pG丨)71 (该 质粒含有gdhA启动子和潮霉素抗性基因作标记基因的表达盒)转化得到双转化 体(double transfonrnin丨),从中选择产率较高的双转化体TB2bl - 44 - GD4、 -GD5、-GD6、-GD7在MDFA优化培养基摇瓶培养后达到最高的表达水平
1968年,K?mfel(l等人最先发现色氣酸衍生物(Tryptophan Derivatives)的 甜味特性,当时他们观察到外消旋的6-三裉甲基色氨酸具有强烈的甜味。进一 步研究表明,这些化合物中当以S -构型存在且带有6 -氣-S -色氨酸结构时, 甜度可达到蔗糖的1000倍。作为色氨酸中间代谢产物,…-甲酰基和/^-乙酰 基犬尿氨酸的甜度大约是蔗糖的35倍,甜味明快。最近,又发现了如图6-29 所示的犬尿氨酸氣化衍生物^3- (4-氣氨茴基)-SS-丙氨酸,甜度是蔗 糖的80倍,没有明显的苦后味。
阁2-丨2在不同pH下温度对阿斯巴甜 图2-13在25弋时pH与阿斯巴甜
(五)甜菊苷对动物繁殖能力的影响
在过去几年内,就如同发现葑基团作为有效的“下面”基团一样,人们对 现有数种二肽甜化合物的数个基团进行了优化。例如,Searie公司对L-天冬氨 酰-D-丙氨酸酯重新进行研究,葑醇化合物的甜度得以提高,其中带(+)- 的异构体最大甜度达到了_倍(见表2-54)。
表S-10 莫奈林的氨基酸组成 单位:个
在pH9,尿素6mol/L、/?_汰基乙W200mmol/L.三紙基中烷盐酸丨OOmmol/L 的级冲液,加入嗉吗甜至丨0-20mg/mL,通氮气,37t保持3b