云溪区安赛蜜
筛选具有水解TCR活力的微生物,通常要经过如下3个步骤。①将微生物置于以棉籽糖为惟一碳源的培养基中进行富集培养。②用超声波破碎微生物细胞,并以对硝基苯-a-D-半乳糖苷为底物对微 生物进行活力测试。那些确定具有对硝基苯-a-D -半乳糖苷活性的微生物, 再进一步检测其水解棉籽糖为半乳糖和蔗糖的能力③对具有水解棉籽糖沽力的微生物再用TCR进行筛选,以确定其水解TCR 的a-半乳糖苷酶活力。 <
三、利用产朊假丝酵母生产莫奈林
用溴化撖(CNBr)将B链蛋氨酸旁边的肽键切断,释放出八肽(Lys-Lys- Thr-Ile-Tyr-Glu-Asn-Glu),残余蛋白质分子的甜味彻底丧失。Frank等人 用同样的方法从A肽链C -端切断八肽碎链并分离开,但未报道对甜味的影响悄 况。有人通过甲基化法考察莫奈林分子中赖氨酸残基对甜味的影响,发现 20% ~40%的赖氨酸残基甲基化后尚不会引起甜味的完全丧失。但随者甲基化率 的提高,甜度会逐渐卜'降直至最终消失。
Ariyoshi等人提出-种不需保护天冬氨酸氨基团而直接合成阿斯巴甜的方 法。他们将L-天冬氨酸酐盐酸化物与4nu)l L-苯丙氨酸甲酯在氣乙烯之类有 机溶剂中发生缩合反应生成《-和芦-型Asp-PheOMe混合物。如前所述,这 种不带保护基的合成反应一般会出现很多副反应。但Ariyoshi等人通过优化反 应条件来克服这种闲难,成功地实现了无保护基合成反应,反应产宇达到 37%左右。这个研究还表明,通过溶解于稀盐酸溶液,是很容易将a-Asp- PheOMe从泠-异构体及其他副产物中分离出,且a - Asp - PheOMe ? HC1易于 结晶析出。
在世界各国的有关文献上,以采用阈值浓度(cT>来比较味强度者较多,所 谓阈值,就是仅能察觉到味逬时的最低浓度,例如甜度一般采取以蔴糖在阈值时 的甜度作1.00为标准。但按Fechnei?规律(c)a,即甜味强度尺与甜味剂浓 度c的n次方成正比。对糖分子来说,其n = l.?;对人工甜味剂糖精和甜蜜素 等,其〃小于丨。如用最稀的觉察浓度(阈值cT)相比,前者为蔗糖的1/700, 较后者小70倍,即以蔗糖的阈值浓度为丨.00时,糖楮的甜度是700,甜蜜素的 甜度是70。但用最高浓度的/??值相比,前者较蔗糖强不到一倍,而后者反不及 蔗糖甜。这是因为搪楮和甜蜜素与甜受体的结合常数分别比蔗糖要大 两个和一个数谊级。当浓度增大时,蔗糖的甜度增加很快,而糖精的甜度增加却 很慢。因此,阈值浓度的甜味倍数只限于作学术探讨用,不能作为实用价值标 准。甜味倍数也受溶剂、pH和温度等的影响。例如,在51时果糖比蔗糖甜, 在60t时蔗糖比果糖甜。因此,试验条件还有必要标准化。
E8,播/】丨丨?专—?性熟化切动子(toinalo fmit - ripening specific promoter);
除天然物外,Hemaruhilcin也可通过合成法制得。以两种酮类化合物为原 料,通过3 -羟基丁醛缩合作用可直接制得外消旋的Hernandulcin。研究表 明,一旦改变了 Hernandulcin的功能因,甜味随之丧失。Hernandulcin分子 中C-厂羟基团和C-丨羰基闭,分別是Shallenberger甜味模型中的AH和B 生甜闭。除此之外,C-4与C-5,之间的双键是该化合物维持甜味的第三个 关键基团。
人类味蕾在舌黏膜皱褶中的乳头侧面上分布最为稠密,因此当人们用舌头向 硬腭上研磨食物时,味受体最易被兴奋起来。味细胞膜的主要成分是脂质、蛋白 质、无机盐和少蛩的核酸,在模型膜不同的磷脂K上各有不同的“味觉”感应, 但人们对此的了解还很不深人。甜受体的物质基础是蛋白质,苦受体可能与蛋白 质也有关联。