东昌府区乳糖醇
七、利用泡盛曲霉基因工程法生产嗦吗甜
为了改善嗦吗甜的甜味特性，可以将它与其他甜味剂相混合以缩短其甜味持 续时间。或把它应用在那些能够充分发挥这种甜味剂优点的产品（如口香糖）， 这样就不需对之加以改性。
1.体外致突变试验
马槟榔蛋白II及其同工蛋白（I、1-1、ID和IV)的cDNAs都已克隆并测序 了。马槟榔iv的c端比in少4个氨基酸，因此它可由马槟榔in得到。马槟榔n 的前体由155个氨基酸残基组成，其中包括信号序列的20个氨基酸、N端延伸 肽的15个氨基酸、A、B链之间连接肽的14个氨基酸残基和C端延伸区的1个 氨基酸残基。序列分析表明n刚形成时两条链中插入了 14个氨基酸组成的连接 序列形成单链，然后在蛋白质成熟过程该连接序列被切除。也有通过载体 pET - 15b已将马槟榔的基因转人大肠杆菌中表达。
一水-令乙?
蔗糖的能量值为16.7kJ/g,阿斯巴甜为16.7kJ/g，纽甜<1.2kJ/g，根据这 些数值可以很容易地计算出，含100g/L蔗糖的饮料能虽为1700kJ/g，含 525mg/L阿斯巴甜的饮料为8.92kJ/g，含17mg/L纽甜的饮料则小于0. 02kJ/g。 也就是说，用阿斯巴甜的饮料所含能量比用蔗糖的低0.52% ,而用纽甜的饮料 所含能S比用阿斯巴甜的至少低0.22%，比用蔗糖的至少低0.001%。从实际效 果看，可认为纽甜是无能量的甜味剂。
由于口腔中的微生物不能代谢纽甜产生腐蚀牙齿的酸，因此纽甜和阿斯巴甜 一样是非致龋性的。
乳糖、RU浓度及反应时间对产物的影响见表4-21。随着底物浓度的增加， RGal-1、RGal-2、RGal -3的数量略有增加。RGal - 1主要在反应起始阶段 (1.5h)形成，然后迅速下降，下降同时形成RGal-2，反应结束时有少最 RGal-3形成。
中数日。收集，水洗，再用lOOOmL水进行重结晶，干燥后可得晶体206g (熔点 150g),得率约82%。若再用甲醇重结晶一次，可得晶体199g (熔点 172-174*00为了最大限度地提髙纯度，最好再用甲醇敢结晶一次。
在嗦吗甜I、A、B基因的y端，加上3-磷酸甘油活化酶（PGK)启动子， 在3'端加上PGK终止子作为转录终点和多聚腺苻酸信号。将嗦吗甜基因试剂盒， 克隆至及co/i-酵母间的运送载体，质粒pJDB209。由于嗦吗甜基因在￡：.?>/〖和 酵母中都能复制，因此既能在中对基闽进行操纵，又能在酵母中对基闪进 行功能测试。但质粒PJDB209含有一个leu2 - d标记，使办-异丙基苹果酸酯脱 氢酶在酵母中的表达水平较低^将带嗦吗甜基因的质粒转移至突变株中， 这样由于约每200个酵母细胞完成一个突变，因此嗦吗甜基因试剂盒利用 率也提髙了约200倍，基因表达水平也相应提高。
