淮上区甜蜜素
1999年，我国有人采用原核生物偏爱的密码子合成了编码单链莫奈林的基 因，使其在大肠杆菌中得到高效表达，奂奈林达菌体可溶性蛋白的20%。在此 基础h，又对单链莫奈林基因进行定点突变，获得突变莫奈林基W，其产物甜度 是蔗糖的4500倍，较天然莫奈林甜度（是蔗糖的3000倍）有显著提髙，产量达 240mg/Lo
Goodman及其合作者应用C -端氨基酸构象强制法，详细研究了基团的大小 和疏水特性对化合物甜味的影响。碳原子上允许双取代，表2-64所示为双 取代基分别是甲基[157]、乙基[158]和环烷基（至环己基）[159]化合物 的甜度，与表2-63所示化合物甜度一样。随着C-端氨基酸大小和疏水性的增 加，并没有发现它对化合物甜味有任何大的影响。当环烷基碳原子数由6增至7 时，化合物突然由甜味转变成苦味，这说明甜味受体和苦味受体是紧密联系在一 起的。表2 -64 双取代基二肽化合物的结构与甜度
(一）糖精的代谢
如图3 -22所示，Vilsmeier试剂是一种较好的氯代试剂，其优点表现在制备 容易和选择性较好，它可安全有效地氣化蔗糖分子4、r和&位，理论得率可达 80%以上。Vilsmeier试剂枭由无机酸氣化物与化学式为R2NCOX的义W - 二烷 基胺（如二甲基甲酰胺、二乙基乙酰胺）反应制得，其中X代表氢原子或甲基， R代表烷基。通常使用的无机酸氣化物有无氣化磷、光气和氣化亚砜等。
对阿斯巴甜及阿斯巴甜盐酸化物的晶体结构作了分析，沿着肽主链的键几乎 都是反式的。根据Goodman等人上述的观点，阿斯巴甜旁链优先存在的构象是 F.D,,而阿斯巴甜盐酸盐优先存在的构象是FBDI。在天冬氨酰羧基 和胺基呈反式存在，因此不是活性构象。相反，Gorbhz认为FuDi是活性构象， 因为它最符合Kier的甜味三角形模式。然而，Kier的三角形模式是根据硝基苯 胺而不是二肽确立的。Heijden等人认为二肽的甜味三角形要比硝基苯胺的大， 因此FnDB构象最符合。另一密切相关的化合物是阿斯巴甜的LiBr复合物，结晶 状态以F,D■为优先构象，所以在固体状态下，阿斯巴甜及其HC1盐、UBr盐的 优先存在构象均不一样。
②新橙皮苷二氢查耳制的为异阿魏酸、m -羟苯基丙炔酸和m-羟苯基丙 烯酸。
由于嗦吗甜有8个二硫键，因此其分子十分稳定，其抗变性能比其他绝大多 数水溶性蛋白（如白蛋白或溶菌酶）都来得强。光谱分析表明，它的a-螺旋度 较低（大约只占整个分子14%),分析其氨基酸组成也可预测到这点。这表明它 并不完全是刚性分子，它的旁链大多处于可溶解的环境中。
控制下表达得到苯丙氨酸和天冬氨酸的聚合体。该聚合体可以用不同蛋白酶， 如可溶性或固定化胰凝乳蛋白酶、水溶性或固定化枯草杆菌蛋A酶Carlsberg、 可溶性蛋A酶K和可溶性蛋内酶嗜热菌蛋白酶水解得到多肽，但这些酶都不 能专一水解得到Asp-Phe。可溶性枯草杆菌蛋甶酶Carlsberg或蛋白酶K的催 化专?性不强，得到的水解产物为ASp-Phe、Phe-Asp和其他由这些二肽聚 合的低聚物；用固定化枯草杆菌蛋白酶催化得到的结果最好，水解产物中绝大 部分为Asp - Phe。
Guadagni等人研究了二氢查耳酮的掩盖去除柑橘苦味物质（柠棣片素和柚 苷）的苦味作用。试验发现，水溶液中柠槺苦素和柚苷出现苦味的浓度分别为 1 mg/kg和20mg/kg。与丨％蔗糖溶液甜度相等的新橙皮苷二氢查邛酮能使柠檬苦 素出现苦味的阈值浓度提高1.4mg/kg，HDG (DI)能将之提高到3.2mg/kg， 与5%浓度的蔗糖溶液甜度相等的n和ID能使柚苷出现苦味的阈值浓度分别提卨 到49mg/kg和56rng/kg。用蔗糖掩盖苦味的效果均比II和DI的差，但柚苷二氢査 耳酮（I)不但不能抑制苦味，而且还会增强苦味。在这方而掩盖去除苦味效 果更显著的是Neodiosmin (VI),结构式见图4-31。它是新橙皮苷黄烷酮类似 物，本身没有味，但稀释至10mg/kg的Neodiosmin就能使苦味物质出现苦味的
