清城区甜菊糖
有人曾用酶法和化学法合成过蔗糖，也用类似的方法合成过自然界不存在的 L-蔗糖（图1-2)。然而令人惊奇的是，L-蔗糖与自然界天然存在的D-蔗糖 一样甜。L-蔗糖与D-庶糖在立体化学上呈镜像关系，是由L-果糖和L-葡萄 糖缩合而成。重要的是，L-果糖和L-葡萄糖-样也是甜的。由于L-糖不参 与人体代谢，W此令人很感兴趣，只要经济上合算，就可作为新型功能性甜味剂 加以开发。
derived,Charles River CD白鼠）；③最敏感的性别——雄性；④最敏感的暴露 期——第二代。
环糊精葡糖基转移酶(CGTase)能将淀粉或环糊精的葡糖基经转葡糖苷作 用转移给其他糖元，因此，可用它催化淀粉或环状糊楮在甜菊苷的糖基上引入新 糖元。转葡糖基反应分2步进行：①由淀粉合成环糊精；②从环糊精转移葡糖 基至受体物质。
图3-16脱三笨卬基的反应式 注：三笨基氯甲烷极易水解为=笨基平醉、
图2-24中，实线和虚线分别表示了不同a值和底物浓度的组合时，G、 与pH的关系。在计算时，因P?2。值很小故用0.02计，因此水的分配对得率 的影响可以忽略不计。图中只幽了 a =丨，Z - Asp和PheOMe = 80mmol/L时的 Yaqy其他情况下Z-ASp-PheOMe在水相的得率很小。由图可知，达到最大平 衡得率时水相pH约为5,比在水溶液合成达到最大得率时的pH低。当《增大 时，则反应物的非离子形态增加，从而L增大。PheOMe和Z - Asp浓度增加都 能使L增大，但增加PheOMe浓度还提髙了合成速率因而效果更好。当pH在
三、利用生物技术法生产Brazzein
由于酵母宿主中内源有对CYH敏感的L41基因，因此细胞中需有多个该标 记基因（3 ~ 10拷贝/细胞）以选择CYH抗性转化体。为增加每细胞中整合载体 的数目，通过从5#端缺失CYH抗性基因的启动子区域构建启动子缺失的CYH抗 性基因的质粒[图5-13 (1)]。该质粒在rDNA片段处线性化后转化至 尽管在亲代质粒PCLRE2 (图5-14)和pCLREll间没有显著的转化率差别，但 进一步的缺失会降低转化率。pCLRE15和pCLRE16的转化率约是pCLRE2的 15%，pCLRE17约是pCLRE2的0. 3%，PCLRFJ8则没有产生转化体。以丨41基 W在每细胞中的拷贝数为2计，经估计拷贝数最多的PCLRFJ7的拷贝数达到每
FSte浓度的模型H?算结果和实验结果均非常符合；但蔗糖浓度的模型计算值比实 验值卜降慢，G、F浓度计算值比实验值增加慢，因此根据该模型计算的蔗糖水 解速率比实验值小。这是因为蔗糖水解参数是根据不加人甜菊苷时蔗糖水解的试 验结果估计，而通常反应体系中加人表面活性剂后，糖类如纤维素、木糖的水解 速率会增大。甜菊苷有亲水和亲油基团，其表面活性加快了蔗糖水解速率的增 加，而计算时没有考虑甜菊苷对蔗糖水解常数的影响，因此加入甜菊苷后，图中 模型拟合曲线不能很正确地反映蔗糖的水解情况，见图4 -25。
