清远市海藻糖
用固定化酶催化合成肽的反应条件优化要考虑3个因素：间定化酶的稳定 性、反应时间和平衡得率。图2-25 (1)所示为a = 15时，固定在Amberlite XAD-7的嗜热菌蛋白酶稳定性、平衡得率、相对起始反应速率。裁体内部最优 pH为5~6。当PH <5时，起始反应速率低且酶不稳定；pH >6时，平衡得率急 剧下降。在大多数情况下，多孔载体内的pH只由底物和产物的缓冲作用决定， 用酸或碱中和的方法很难调节。这是阂定化酶以非水溶性有机溶剂为介质催化合]’可增加酶的稳定 性，但得率仍会逐渐下降。在CSTR整个反应器中，底物和产物浓度各处均 相等。
新橙皮苷转化成新橙皮苷二氢査耳酮的方法与柚苷转化成柚苷二氢丧耳酮的 方法一样。将250g新橙皮苷加入1250mL10%的氢氧化钾溶液中，再加10%的 钯-碳催化剂（23g)催化氢化，过滤，酸化，用水稀释至2900mL,置于冰箱
一年的慢性饲养试验以大鼠和狗为试验对象，两年的致癌性试验以大鼠和小 鼠为试验对象。用大鼠做的一年和两年的致癌性试验包括其父代和母代在交配前的 接触以及宫内接触，试验的动物从怀孕、分娩前和分娩后的发育，以及整个的成年 期都在接触纽甜。给大鼠添加剂童为lg/(kg ? d),给狗添加剂量为0.8g/(kg . d) 的纽甜所做的一年慢性试验没有显示有靶器官的毒性。两年的致癌性试验用宫内接触 方式给大鼠添加剂置达lg/(kg*d),或小鼠剂量达4g/(kg*d)的纽甜，也没有发 现靶器官的毒性或致癌性o
(四）总结
以嗦吗甜基因中322bp Ncol片段作为探针，与九awamori基因组中的单拷贝 gdhA基因杂交的694bPPvuII片段作对照，对转化体进行DNA印迹杂交分析以估 计各转化体中嗦吗甜表达盒的数最。分析表明，在各转化体的表达盒没有发生重 排，各拷贝数为5~14 (表5-9),表达盒的拷贝数与嗦吗甜产率有明显的相 关性。
(-)甜味受体的发现
Nofre等报道，以5%钯碳作为催化剂，在40T、0. 4MPa氢压下对甲醉化的 APM氢化13h，当催化剂含水量为60%，且循环使用5次后，催化效果最好。 反应结束时，氢化反应液中含NTM89. 5%、APM7. 3%、二取代APM0. 6%和二 取代脒唑酮类化合物（二肽结构物质环化形成的副产物）1.3%。将上述氢化反 应液在40T下加一定萤的水，水解3h。水解反应结束后减压浓缩至甲醉浓度为 25%，冷却析晶，并冷冻至使结晶完全。40尤下真空干燥2d可得纯度近 100%的NTM,以起始原料计，NTM的回收率为73%。
图3-14羟基的保护方法
图3-16脱三笨卬基的反应式 注：三笨基氯甲烷极易水解为=笨基平醉、
