山阳县糖精钠
也可以通过烟草表达莫奈林。首先合成了由噬菡体PI Cre重组酶介导的特异 ?组位点丨OXP的序列，构建了两个loxP同向重复的棺物表达栽体pGLX121. 1。 PCR定点突变了 CaMV 35S启动子元件中kozak序列，使kozak中的翻译起始密码 子ATG位于Ncol位点上。把spm基因克隆到表达载体pG〖MA的Ncol和PstI之 间，给甜蛋白8pm基因加上35S启动子和polyA及NOS终止子元件，然后克隆到 PGLX121. 1的EcoRI位点上，用农杆菌LBA4404转化烟草，获得卡那痗素抗性转 基因植株，经过PCR及southern分析，证明甜蛋白spm基因已整合到烟荩基因组 内。用转基因烟草的总RNA通过RT-PCR反转录扩增spm基因，证明了在35S启 动子及其他调控元件的控制下，spm基因在转基W烟草中转录表达出mRNA。提取 转基因烟草总蛋白，经SDS-PAGE分析，初步证明了 8pm基因在转基因烟草中表 达出目的甜蛋白。
苯酐先与氨水和氢氧化钠进行酰胺化反应，之后在碱性条件下与次氣酸钠进 行霍夫曼降级反砬制得邻氨基苯甲酸，邻氨基苯甲酸与亚硝酸钠在酸性条件下进 行重氮反应，接着与二硫化钠进行罝换反应得到邻二硫二苯甲酸，邻二硫二苯甲 酸与甲醇酯化反应后再被液氣氯化，其后与苯酐法相同，进行胺化、酸析和中和 反应，生成糖精钠。 ?
一般认为，在实用条件下，嗦吗甜的相对甜度为蔗糖的2000 ~ 2500倍，但 它的甜味特性与蔗糖有所不同。它到达最大甜度的时间较长，甜味持续时间也较 长，这是它与蔗糖在甜味特性方面的主要区别。嗦吗甜没冇糖精、甘草甜素、甜 菊苷一类强力甜味剂通常带有的不愉快苦后味、金属或化学后味，也没有新橙皮 苷二氢查耳醐所带有的类似薄荷醇的冷却口感。
(二）氢化还原法制备纽甜纽甜的化学合成主要是通过APM与3, 3 - 二甲基丁醛经催化加氢还原 W-烷基化反应制得，其反应原理如图2-48所示。ffl2-48 阿斯巴甜与3, 3-二甲基丁醛反应制备纽甜
莫奈林娃从D. cumminsii的浆果果肉中提取出的甜味蛋白一般用水法抽提， 抽提液经离心分离、超滤浓缩后用离子交换色谱法提纯楮制，再经超滤脱盐后冷 冻干燥。起初，1kg浆果只能获得100?150mg的莫奈林，现在的提取得率已提 髙至3~5g。大批量处理时，可使用分批吸附法。先将水抽提液与分散在 0.02nu,l/L醋酸铵缓冲液（PH5.0)的吸附剂CM - Sephadex C25淤浆混合，接 着用水反复冲洗淤浆达到纯化的目的，然后用0.02mol/L NaCl溶液将吸附在 Sephadex上的莫奈林洗脱下来，超滤浓缩后冷冻干燥。这样分离得到的莫奈林， 若在离子交換色谱柱上分别用NaCl浓度呈梯度上升的PH7. 6和PH8. 2缓冲液进 行洗脱，还可进一步分级成5种纯组分，依次称为莫奈林I ~V,其中最主要的 是莫奈林IV。
单链兑奈林蛋白已经在带有含Tip启动子的表达载体的大肠杆菌菌株W3U0 中得到生产。重组SCM与天然的莫奈林甜度相同，但是其热稳定性和酸碱稳定 性要高些。Sung等人把SCM克隆于带有T7lac启动子的{^:121载体中，同时表 达了重组SCM和SCM突变体。
①合成马槟榔D的A链（Glul-Asp33)和B链的三个片段（Glul-Pro20、 Cyc21 - Gly41 和 Pro42 -Trp72)；
这是英囯Tate & Lyle公司提出的新方法，首先利用芽孢杆菌属的菌株在 30弋下发酵Glc，生成葡萄糖G-6-a (葡萄糖-6-乙酰酯），采用甲醉抽提及 硅胶柱层析分离相结合的方法提纯，然后G-6-a与蔗糖的混合物，在由巨大 芽孢杆菌产生的果糖基转移酶的作用下，生成S-6-a，采用色谱分离的方 法，可分离出70%纯度的S-6-a。将之与Vilsmeier试剂反应对4、厂、6'三个 羟基进行选择性氣化后，再经脱乙酸基反应即得到终产物三氣蔗糖C
纽甜的去酯化过程中也会产生微量的甲醇，但是在纽甜合理摄人范围内，其 代谢所产生的甲醇不会造成安全性问题，即便在消耗髙达90%的预测摄人a的 纽甜时，所产生的甲醇与日常膳食中所产生的甲醇黾相比仍可忽略不计。比如，
