韶关市水苏糖
图5 - 15 莫奈林表达盒构建
如果Thaumalococus果实尚未完全成熟就被摘下，甜蛋內的进一步生成还会 持续好几天，即使果实已经完全与植物相分开，此时如果用具有放射活性的二氧 化碳（l4co2)气体来进一步熟化这种未成熟的果实，那果实中所生成的甜蛋白 也有[14c]标记。该研究淸楚表明甜蛋A嗦吗甜的生成主要是通过假种皮，这 就为遗传控制提供了一个理想的机会。遗传控制的目的在于利用另一宿主来产生 嗦吗甜，全世界有两个单位较早进行这方面的研究：一是位于大不列颠坎特伯?雷 市（Canterbury)的Kent大学，另一个是位于荷兰Vlaardingen的Unilever研究室 中的微生物与有机化学研究组。
对不同内阻下场强对转化率和活细胞的影响作了研究（图5 -18)。细胞悬 浮液与1叫经Bgi fl酶切的pCLRE2混合后在电容25jjlF下进行电脉冲转化，电 脉冲后，细胞在30T添加了 lmol/L山梨糖醇的YPD培养基上培养6h。在场强 为3.75kV/cun和内阻80W1时得到最高的转化率，约为1400个转化体/jxg线性 pCLRE2。在3. 75和5. 0kV/cm和内阻6(X)、800或100011时转化率较高[图 5-18 (1)]0这些条件下细胞存活率为10%?40%，实际脉冲时间为11 ~ 17ms [图5-18 (2)]。当内阻200或400ft时，转化率低。
图5 - 19 在非选择性培养箪培养50代后各转化体产物的SDS - PAGE图 注：箭头所指为单链莫奈林分子位
素有关。
Sun等人成功地在转基因莴苣中获得了重组奇异果索，首次从外源宿主获得 具有生物活性形式的奇异果素。编码奇异果素的cDNA是用R duUifica果肉中的 所有RNA合成的，并被克隆于植物表达载休——PBI121或pBE2113-GUS。载 体pBI121和pBE2113-GUS都含有CaMV35S启动子、胭脂碱合成酶（nos)启 动子和终止子。此外，PBE2113-GUS载体中还含有带翻译增强子（E12-35S- H)的启动子盒。所有这些都被引人A 菌株GV2260。通过感染带载
高效甜味剂（丨numse sweeteners)的单位质世相对甜度一般都在蔗糖的几十 倍以上，很多都是几百倍，有的能达到几千倍、几万倍以上。其基本特征是单位 甜度成本低，低能虽或无能量，非龋齿或抗龋芮，可供特殊荇养群（如肥胖症、 糖尿病患者）食用。近年来，随着我国经济的迅速发展和人民生活水平的不断 提髙，对高效甜味剂的需求最日益增加，市场前录十分广阔，只是对它进行认真 的科学研究还为数不多，为时不久。
表3 -8 酶法水解四氣棉轩糖制备的酶活力比
(二）嗦吗甜的三级结构
