罗庄区安赛蜜
达水平没有区别。但是在rDNAK整合的质粒转化体，在非选择性培养基上 培养50代后，莫奈林产量明显下降，而整合点在UKA3区的质粒的转化体 中没有明显下降，见图5-19。不带萸奈林表达盒的载体一直都保持稳定， 这说明莫奈林的高产可能会导致在rDNA区粮合载体稳定性的显著下降。且 培养50代后，pUMll转化体对CYH (4(Vg/inL)保留抗性的细胞数占总细 胞数的80% -100%, pCLRM216和pRM丨丨转化体为0% ~ 30%。这些结果 表明URA3区是在C. utilis中最优多拷贝整合点。URA3栽体除能维持载体序 列稳定外，它还在转化前去除了细菌序列，这对于食品工业蛋白质生产是很 有益的。
除了直接的治疗效果，甘草甜素还可作为辅助的治疗手段以减少其他用药的 毒性。例如，虽然皂角苷在治疗上具有很多的优越性，但肠道对它的吸收率较 低，如果通过静脉注射又会因它的溶血特性而带来毒性，然而，在有甘草甜素同 时存在下，它具有抑制皂角苷和皂角配基的溶血作用。在注射皂角苷前预先注射 甘草甜素和红细胞，这能使甘草甜素的抗溶血作用得到最大的发挥。甘草甜素之 所以具有抗溶血作用，是因为它能在红细胞表面吸收溶血素而阻止溶血素向它接 近。但甘草甜素作为抗溶血剂用在活体内的效果值得怀疑，因为此时要达到与活 体外试验相同的效果所需的剂量很大。
Neoculin分子中的8个半胱氨酸残基均参与形成二硫键，因此异型二聚体当 中有4个二硫键[图5-26 (1)]。其中，两个是亚基内二硫键（位于每一亚基 的Cys29和Cys52之间），另外两个是亚基间二硫键（位于一个亚基的Cys77和 另一亚基的CyS109之间）[图5-26 (1)和（3)]。甘餌醉结合植物凝集素中 同样存在亚基内二硫键，但不存在亚基间二硫键。
不同来源的半乳糖苷酶催化得到的转糖苷产物见表4 -23。其中K. laclis 的芦-半乳糖苷酶不对RU进行转半乳糖苷反应。环状芽孢杆菌的-半乳糖苷 酶在反应初始阶段优先将半乳糖基转移至RU的19 -羧基相连的葡糖基上，得到 以芦-1，4糖苷键连接的RGal - la,然后得到RGal - lb。RGal - la是CGTase 转糖苷的良好受体，因为其19-羧基相连的葡糖基上的C4-0H已用半乳糖基 保护。而大肠杆菌的卢-半乳糖苷酶主要将半乳糖基转移至19-羧基相连的葡糖 基上，得到以尽-丨，6糖苷键相连的RGal-2，该产物不适于用作CGTase催化 转糖苷反应的糖基受体，因糖基会优先与13-0H相连的葡糖基连接。米曲裤 {As. oryzae)和P. 的芦-半乳糖苷酶催化得到RGa丨-1、RGal - 2、
应，然后加入适话的亚硫酸氢钠溶液，料液转稀后，再加入热水溶解，静置后分 离、过滤，分取油层得邻氨基苯甲酸甲酯（简称甲酯）。先将由水、硫酸与盐酸 配制好的混酸置于重氮锅内，冷却后开始缓加甲酯和亚硝酸钠溶液的混合液，觅 氮温度保持在25T以下，反应终点时淀粉碘化钾溶液显淡紫色，产物为邻硫酸 (盐酸）觅氮苯甲酸甲酯溶液（简称重氮液）。
莫奈林娃从D. cumminsii的浆果果肉中提取出的甜味蛋白一般用水法抽提， 抽提液经离心分离、超滤浓缩后用离子交换色谱法提纯楮制，再经超滤脱盐后冷 冻干燥。起初，1kg浆果只能获得100?150mg的莫奈林，现在的提取得率已提 髙至3~5g。大批量处理时，可使用分批吸附法。先将水抽提液与分散在 0.02nu,l/L醋酸铵缓冲液（PH5.0)的吸附剂CM - Sephadex C25淤浆混合，接 着用水反复冲洗淤浆达到纯化的目的，然后用0.02mol/L NaCl溶液将吸附在 Sephadex上的莫奈林洗脱下来，超滤浓缩后冷冻干燥。这样分离得到的莫奈林， 若在离子交換色谱柱上分别用NaCl浓度呈梯度上升的PH7. 6和PH8. 2缓冲液进 行洗脱，还可进一步分级成5种纯组分，依次称为莫奈林I ~V,其中最主要的 是莫奈林IV。
邻甲基苯胺法所用原料为邻甲基苯胺、亚硝酸钠、硫酸、铜粉、二氧化 硫、液氣、氨水、活性炭、液体氢氧化钠、盐酸、髙锰酸钾、亚硫酸钠和碳 酸氢钠等，主要化学反应有：觅氮、置换、氣化、胺化、氧化、酸析与中 和等。
0-2之间的分子内氢键。种种迹象表明，它在水溶液中存在着丨个或多个这类 氢键，这对三氣蔗糖在酸性水溶液中特別稳定的性质起者很大的作用。
甜菊苷带有轻微的类似薄荷醇的苦味及一定程度的涩味，味觉特性要比甜菊 双糖苷A差些。随着产品纯度的提高，甜菊苷的苦涩味冇所减轻，图4-3所示 为甜菊苷与蔗糖、甘草甜素在等甜度条件下味觉分布的对比情况，从中可以看出 除f持续的后味外，甜菊苷的口感类似蔗糖。有些文献上提到的部分配方，目的 都是为了改善甜菊苷的味觉特性，掩盎其不良后味，所用的配料包括氨基酸、结 晶果糖、蔗糖和葡萄糖酸内酯等。甜菊苷与甘草甜素-?起使用可起到相互改善n 感的作用，与阿斯巴甜、甜蜜素或安赛蜜混合也有协同增效作用，但与糖铕混合 时口感的改誇甚微。
值得注意的是，三氣蔗糖-3,, 4#-环氧化物是不甜的。由于环氧化作用所 导致的呋喃环构象形变，并不足以抵消三氣蔗糖和受体模型之间的色散作用，这 就意味着果糖基的3#-oVl是构成甜味AHs/BJ、t的必需部分。同样，2，r-二 氧-2，1'-二脱氧-甘餌蔗糖也不甜，说明葡糖基的2-OH也是蔗糖衍生物甜 味所必脔的。
