谢家集区AK糖
五、利用固定化酶法合成阿斯巴甜
⑤蔗糖C -4'位羟基的移去并不损害蔗糖的甜味，而增加C 位取代基的 大小和硫水性会使甜度显著增加。
根据R,和R2基团的酯基和烷基能够互 相罝换这一事实，可认为在这两个位罝上与 甜受体之间的相互作用，与其说是静电吸引 作用还不如说是大小和形状的相互配合。当 &和R2都是疏水性基团且R,小于&时，所 生成的天冬酰胺（图2-73 in)具有 甜味。
制备三氣蔗糖的核心在于对活泼的C - 6位羟基进行保护，使之不被氣化。 所谓单基闭保护法，就是只对蔗糖分子8个游离羟基中的C-6位羟基进行专一 保护，然后直接进行选择性氛化。该方法可以使反应过程大幅度简化，但一般需 要髙效的色谱分离操作。
m [127]的甜度是蔴糖的58倍，但令人难以理解的是，反式-2-甲基环己基 酯及其他酯并没冇甜味。D, L-Ama-DL-Ama-OMe的金刚烷基酯[丨28]具 有很高的甜度。
所谓协同增效作用，是指两种甜味剂共用时甜度陡增的现象，如甘草酸铵本 身的甜度仅为蔗糖的50倍，但当与蔗糖共用时可增至100倍，这不是简单的甜 度加成，故称为协同增效作用。目前，关于两种甜味剂混合使用时是否有协同增 效作用的文献报道很不一致。即使是同一种甜味剂的两种不同浓度0,和02溶液相混 合，也有可能误会是产生r协同增效作用。这是因为(cl+c2)\若n=2,那 么/?=W+2fc,c2+g，而通常有人误以为甚至+屺，就认 为有协同增效作用。类似结果也适用于两种不同甜味剂的混合，故会产生虚假协同 增效作用的报道。
第五章高效甜蛋白
通过对各种卤代脱氣蔗糖构效关系的研究和比较，可以总结出如下几个 规律：
以核糖体蛋白质L41基因为标记，将用32P标记的含C. makosa的RIM - C基 因的Xbal -Sau3AI片段与Candida utUis ATCC9950的基因组DNA进行DNA杂交 分析，结果表明存在一个与KIM - C基因同源的基因。对Candida ut'dis ATCC9950的DNA用Sau3AI进行部分切割后的片段（5~10kb)转人经BamHI 酶切的质粒PBR322构建基因组DNA文库，用RIM - C基W探针对约30 000个 克隆子进行筛选，筛选得到5个正（positive)克隆子，对其中3个质粒构建了 限制性酶切谱图（图5-11)。该同源基W在质粒DNA上的大致位置通过对质粒 的限制性酶切片段进行DNA杂交分析得到。将能与探针杂交的4kb EcoRI片段 双向亚克隆至质粒pBluescript II SK进行DNA序列分析，现已测定广含L41基因 的2086hP的BamHI - SacI片段的DNA序列（图5 - 12),其排序策略如图5-11 所示。
