德保县甜蜜素
莫奈林娃从D. cumminsii的浆果果肉中提取出的甜味蛋白一般用水法抽提, 抽提液经离心分离、超滤浓缩后用离子交换色谱法提纯楮制,再经超滤脱盐后冷 冻干燥。起初,1kg浆果只能获得100?150mg的莫奈林,现在的提取得率已提 髙至3~5g。大批量处理时,可使用分批吸附法。先将水抽提液与分散在 0.02nu,l/L醋酸铵缓冲液(PH5.0)的吸附剂CM - Sephadex C25淤浆混合,接 着用水反复冲洗淤浆达到纯化的目的,然后用0.02mol/L NaCl溶液将吸附在 Sephadex上的莫奈林洗脱下来,超滤浓缩后冷冻干燥。这样分离得到的莫奈林, 若在离子交換色谱柱上分别用NaCl浓度呈梯度上升的PH7. 6和PH8. 2缓冲液进 行洗脱,还可进一步分级成5种纯组分,依次称为莫奈林I ~V,其中最主要的 是莫奈林IV。
(二)甜蜜素的甜味特性
图4 -11所示为在非均匀酶反应体系中,环糊精葡糖基转移酶为100 ~ 1500U/g
(三)临床前期的安全性试验纽甜临床前期的安全性试验主要包括亚慢性、慢性和长期致癌性试验(表 2-30)。试验所选择的动物有大鼠、小鼠、狗和兔子等。在试验过程中,把纽 甜添加在动物的饲料中喂养,并且要定期调整饲料的配方和浓度以维持每日每千 克体重摄入量的稳定,而不是在饲料中添加固定百分比的纽甜。在毒性试验中用 显微镜来检查各种不同剂量范围的全部动物组织,用标准和补充指标来评价免疫 毒性、神经毒性或对行为的影响。
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图2 -37由单晶X -衍射法所推出的纽甜晶体中疏水取代基的U ■构象
⑤棉籽糖水解法。
棉籽糖是蓆糖分子的Glc (葡萄糖)一侧再接上一个Gal (半乳糖),是一 种三糖分子。由于棉籽糖的Gal基正好位于蔗糖C-6位,充当着C-6的天然保 护基团。因此,本方法是以棉籽糖为原料,直接进行选择性氣化制得6,4\ \\ 6"-四氣棉籽糖,再经a -半乳糖苷酶水解去除Gal-6-Cl即得三氣蔗糖。
Miyashi丨a 等人应用 SIMCA 模式识别法(paHern recognition method)分析了 108种二肽同型物。分析时考虑到“大小”(摩尔折射系数)、“形状”(Sleri- mol)和“带电”(c。F-个W素的影响。最后表明,“大小”和“形状”是影 响甜度的两个重要因素,而带电因素并不重要。