丘北县甜蜜素
采用固定化酶牛.产，可以实现连续操作和酶的重复利用，且酶更稳定。但如 果在水溶液中反应，产物沉淀在多孔载体或外部溶液中，收获闲难，因而不可 行。Oyania和Nakanishi等在有机溶剂中用固定化嗜热菌蛋白酶连续催化反应, 由于Z-AsP - PheOMe可溶解在有机溶剂如乙酸乙酯中，因此就避免了上述 闲难D
产率。
现在，人们正努力研究以期分离出能引起上述反应的专一微生物。已发现很 多细菌具有分-葡糖犴酸酶的活性，能将甘草甜素水解成甘草亭酸。只有两种细 菌可将3 -脱氧-18 -卢-甘草亭酸还原成甘草亭酸或3 -表-18 -甘草亭酸。 从人的新鲜粪便中分离出的瘤符球歯属(Riimirwcoccus)具有水解甘草甜素生成 18 -P -甘草亭酸的功能，另外可将3 -脱氢-18 -甘草亭酸还原成对映体 3-表-18-0-甘草亭酸的梭状芽孢杆菌(Clostridium)也是从人刚排出的粪便 中分离出来的。这两种细菌的混合体能将甘草亭酸异构成3 -表-18 -办-甘草 亭酸，反过来也如此。这一过程可能是通过氧化中间体3-脱氢-18-/3-甘草 亭酸而进行的。甘草甜素转化成3-表-18-分-甘草亭酸是分几步进行的，其 中的终端异构物（isomer)是几种细菌的?种产物。所有变化可概括成：甘草甜
(4)口香糖和糖果。
用酶-化学联合方法制备纽甜可以进一步通过固定化酶技术将脂肪酶或酯酶 固定在硅胶、次乙酰塑料（Celite)、DEAE-Sephadex、CM - Sephadex等类似的 固定相上。酶的固定化，不仅可以方便地实现酶的循环利用，还可以很容易地分 离酶和产品，使酶-化学法生产纽甜有着更大的优势。
五、髙效甜味肽的分子基础与构效关系
(一）甲苯法
1991年，Timi和Nofre提出多点结合甜味理论。该理论认为，人体甜味蛋白 受体最少包含8个基本的识別部位，并与甜味分子上相应的结合部位发生相互作 用。这一理论也能用来解释AMP及其衍生物具有强力甜味的原因，如图2-89
图2 -23 401时，饱和缓冲溶液和水/有机溶剂二相体系中pH和 Z - Asp - PheOMe相对起始速率关系图 注：①--0-,表示在乙酸乙?炮和缓冲溶液的反应，緩冲液中落有0. 05rool/L Me? . NaOH, Snunol/LCaClj > 0.013mmol/L 嗜热箱务台柏.、80mn?oI/L PheOMe ? HCK 80mmol/L Z - jVsp；②?和漕，表示在以乙破乙?为有机溶射的水/有杌滚則二相体系中的反应；③參，表示在凍冲液pH7.0时，根梅在有机相的Z-Asp-PheOMe算得的起始速牟的相对苜分教；④表示根据在水相的Z - Asp - PheOMe算得的起始速芈相对苜分教；⑤虚线表示理论值a
