思礼镇二氢查耳酮

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思礼镇二氢查耳酮

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三、Neoculin的化学结构与晶体结构
表S-10 莫奈林的氨基酸组成 单位:个
在嗦吗甜I、A、B基因的y端,加上3-磷酸甘油活化酶(PGK)启动子, 在3'端加上PGK终止子作为转录终点和多聚腺苻酸信号。将嗦吗甜基因试剂盒, 克隆至及co/i-酵母间的运送载体,质粒pJDB209。由于嗦吗甜基因在£:.?>/〖和 酵母中都能复制,因此既能在中对基闽进行操纵,又能在酵母中对基闪进 行功能测试。但质粒PJDB209含有一个leu2 - d标记,使办-异丙基苹果酸酯脱 氢酶在酵母中的表达水平较低^将带嗦吗甜基因的质粒转移至突变株中, 这样由于约每200个酵母细胞完成一个突变,因此嗦吗甜基因试剂盒利用 率也提髙了约200倍,基因表达水平也相应提高。
Vilsmeier试剂是一种较好的氣化试剂,其优点表现在制备容易和选择性较 好,它可安全有效地氯化蔗糖分子4、r和6#位,理论得率可达80%以上。 Vilsmeieri^剂是由无机酸氣化物与化学式为R2NCOX的W,W - 二烷基胺(如二 甲基中酰胺、二乙基乙酰胺)反应制得,其中X代表氢原子或甲基,R代表烷 基。通常使用的无机酸氣化物有五氣化磷、光气和氣化亚砜等。Vilsmeier试剂可 以直接在氣化反应体系中生成,但最好在使用前预先制备。
除了对二氢氧氮水环二氧化物环上不同取代产物进行研究外,人们还合成r 结构类似的化合物以观察环上的变化对其甜味的影响悄况,但没发现其他任何新
大多数转葡糖基反应采用均匀酶反应体系,以可溶性淀粉或环糊精作为 葡糖基供体,葡糖基供体、受体均在溶液中,因此产物分离困难,并且反府 生成大童非目的还原糖。若以不溶的原淀粉为葡糖基供体,利用残留淀粉的 不溶性可以简化产物分离纯化工序,但原淀粉具有紧密的晶体结构,W此转 葡糖基反应速率和得率都很低。对原淀粉经挤压膨化处理后能以溶胀状态息 浮在水中,得到的反应体系与原淀粉相似,但反应速字和得率都比原淀粉反
由于微生物表达系统在产生功能蛋白方面的不理想,科学家们逐渐将注意力 集中在转基因植物的研究上。在马铃蕃中的表达成功启示可以将甜味蛋由基因转 进其他畜用或人用经济作物中表达,从而增加其食用价值。同时由于甜味蛋白的 表达fi仍然偏低,培养出高效表达的转基因植株仍是一大难题。
TB2bl -44的产物经纯化后得到三种嗦吗甜组分A、B和C (图5-9), 它们与天然嗦吗甜组成略有区别。这是由于在质粒构建时,在表达盒中采用了 两个串联重复的Lys-Arg序列,使KEX容易识别,从而对B2 -嗦吗甜融合蛋 白进行切割释放嗦吗甜。因此在KRKR序列不同位点切割后产生这三种组分, A组分为嗦吗甜II末端加了一个Arg,占丨8%~20%; B组分为嗦吗甜II末端 加了 LyS-Arg,占75% - 78% ; C组分为嗦吗甜II末端加了 Arg - Lys - Arg, 占3% ~5%。由于TG丨)Th-4上淸液中嗦吗甜的结果相同,这三种形式的纯嗦 吗甜都有甜味。

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