湾里区木糖醇
三氟乙酰化二肽衍生物的结构与甜
过在60弋保持lOmin，然后在4t、pH4.5条件下保持lh,可得接近单一组分的 莫奈林（经SDS - PAGE测定）。通过离子交换柱可进一步纯化，得率约为 100mg/10g湿酵母（700mg可溶蛋白〉。提纯得到的萸奈林与天然莫奈林甜度一 样，阈值丨网，通过CD光谱分析比较重组莫奈林和天然莫奈林的二级结构单 元，因此可以预料两者必然有相同的三级结构。
注广，从氨基洎开始计算。
Searfe公司的早期研究表明，没有一种天然存在的氨基酸可代替天冬氨酸， 而且其氨基和羧基团必须保护未取代状态。如表2-55所示，用磷酸根
大了它的应用范围。当阿斯巴甜与碳水化合物彻甜味剂（如蔗糖、果糖或葡 萄糖）混合时，产品能量下降不少而甜味却没有变化。当阿斯巴甜与强力甜 味剂（如糖精、甜蜜素、安赛蜜或甜菊糖）混合使用时，产品有时略带有苦 涩味，这可通过加大混合物中阿斯巴甜的比例来改善，改善程度随阿斯巴甜的 比例增大而增大。混合甜味剂协同增效作用与各组成甜味剂所占的比例及食品 配料系统有关。
酯化反成的条件还依赖于酰化试剂的特性。蔗糖和乙酸酐在碱性条件（如 吡啶溶液）下很容易反应，结果生成较高得率的蔗糖单酯化物。但在有水存在 且为强碱性的条件下，蔗糖和乙酸酐反应更容易生成多酯化物。尽管蔗糖的酰化 反应也可以在酸件环境中进行，但酸性环境容易导致蔗糖的水解。值得注意的 是，蔗糖在吡啶溶液中与乙酸酐作用，虽然可以生成较高得率的蔗糖单酯化物， 但单基团保护法的成功不仅取决于生成蔗糖单酯化物，还要求单酯化物尽可能以 S-6-a为主。因此，选择蔗糖和乙酸酐在弱碱性（吡啶溶液）条件下反应，以 保证生成高得率的蔗糖单酯化物。
(三）邻甲基苯胺法
奇异果素存在于果浆，不溶于水。曾有研究用含有高碱性化合物如鲑精蛋白 (Salmine)或精胺的碳酸盐缓冲液（PH10.5)进行提取，这样容易导致变味活 力的下降，而且溶解了多种很难去除的深色物质，无法得到高纯度的样品。奇异 果素能用0. 5mol/L酸性NaCI溶液提取，这样得到的奇异果素在酸性pH中很稳 定，并且提取液无色。Sarroch Theerasilp和Yoshie Kurihara开发了奇异果素的提 纯工艺：冻干的果浆中的活性成分经0.5mol/L NaCI酸性溶液溶解抽提后用 (NH4)2S04分级沉淀，沉淀再经CM - Sepharose离子交换色谱和CcmA - Sepha- rose 4B柱提纯。用该方法得到的奇异果素纯度非常髙，得率为20g冻干果浆提 取得到36mg产品（表5-18)。
显然，具有显著a-半乳糖苷酶活力的酶制剂都是从霉菌菌丝体中获得的。 在5个具有最强的水解TCR活力的筠菌中，有4个是从W.wVwcefl中获得的，有 1个是从C. muscae中获得的。其中Af. vitmcea ATCC 20034在所有被测试的微生 物中，对TCR具有最高的水解能力。从该微生物中提取的a-半乳糖苷酶（EC 3.2.1.22)不含转化酶的活力，目前已在甜菜糖精炼中被用来水解棉籽糖。它还 可以被固定化，此时对TCR则有更强的水解能力。
图3-40蔗糖分子的生甜团C-4 (X)、C-2 (B)和C-3f (AH)
