四子王甜蜜素

四子王甜蜜素
决定。”
三氣蔗糖溶液的稳定性随pH、存放时间及温度而定，以pH5左右的稳定性 最好。图3-6所示为201时三氧蔗糖在不同PH条件下的稳定性，其分解过程 符合第一动力学定律。在较高温度下，三氣蔗糖降解速度加快。图3 -7和图 3_8表明，在75T和丨00T环境中的稳定点出现在pH5时。在PH3、75T条件下 三氣蔗糖的分解率为0.2%/h，而在lOOt时为2%/h。
质粒pET-3a/SNase-SW转化至大肠杆菌BL21 (DE3) /pLysS菌株进行表 达。采用pLysS菌株可以消除引人前核酸酶的不利影响，更有利于核酸酶- Brazzein融合蛋白的表达。转换后在37T加人100|xg/mL阿司匹林、34jjig/mL氣 霉素的Luria培养基（LB)中培养一段时间后，加人IPTG后培养2~3h，大肠 杆菌中分子质萤23ku的融合蛋白产量达到最大，多数在内含体沉积，在16%的 Tricine凝胶中50%?70%的融合蛋白不溶。内含体蛋白经电泳凝胶提纯后，大 部分融合蛋白重新折黉(refolded),提纯纯度> 80%。经CNBi?处理后， 50%?70%融合蛋白发生解离，这说明融合蛋「丨不能完全解离。因Brazzein酸性 较强，p/约5.4，而核酸酶碱性较强，p/9.4，因此融合蛋白解离后用阳离子交 换色谱即能分离产物。纯化得到的重组Brazzein具有较高纯度及正确的分子质量 (6.4ku)0解离后得到的肽链与^-pGlul -Brazzein序列相同，甜度是植物提 取Brazzein的2倍，与从植物中分离得到的如-pGlul - Brazzein甜度相当。已 研究表明蛋白质只有在折垒正确时才具有甜味，未折垒(unfolded)或折奋错误
符合下列通式化合物的结构与甜度的相互关系注：①Me 中基；El 乙基；iPr 异而基；Ph 苯基；c 坏..②以摩尔教计，与2%蔗鐮溶液（58.4_ol/L)相比较的倍教。(2)叔丁基-L-半胱氨酸甲酯基，它是赛贝甜（Cybelame)的成分之 一。以摩尔数计，赛风甜的甜度约为蔗糖的23000倍，以质量计约为20000倍。 赛贝甜是纽甜系列中所发现的最甜的化合物[固2-43 (2)]。纽甜具有纯正的甜味，十分接近阿斯巴甜，没有其他强力甜味剂常带有的苦 味和金属味。在各种条件下，它的风味分布都与阿斯巴甜没有明显差异，图 2-44所示为它们在两个不同体系中的风味分布的比较。如图2-45所示，虽然 纽甜甜味刺激的形成与蔗糖类似，怛与阿斯巴甜相比，可以感觉到其甜味形成的 最初略有滞后，而甜味持续时间则略长。与阿斯巴甜类似，在复杂的食品体系 中，可根据需要加以其他配料，如多元醇、蔗糖或含氧酸来改变这些暂时效应。 图2-45中，时间-甜味强度曲线的主要参数：(1)最大强度值/_ (以平均强度单位0?15表示）：阿斯巴甜9.2,纽甜9.0。阁2 -44 以纽甜和阿斯巴甜增甜的饮料中风味分布的相似之处 (1)在水滚液中，纽甜20mg/L,阿斯巴甜560mg/l,(2)在邛乐饮料中.纽甜丨6mg/丨.，阿斯巴甜525m(/L
表2 -27 纽甜晶体X -射线衍射特征峰值表2-28 各种晶型在70^：的稳定性
(1)两个谷氦酸1彡mGluRl的两个拟体的结合（钴合T活性态Aoc的闭合构象MOI.I的谷?酸占用 了 LB1和KB2丨?.的残茱；而钴合于打开构象M0L2的桴软酸只占用了 LB2上的残基）
纽甜酯和酶的混合物加人到含有5%?50%乙腈（或DMSO和DMF〉的
通过气相扩散法往含奥奈林的缓冲水溶液中混合人20%乙醇，可制得莫奈 林结晶体。晶体大小约0. 5mm x0. 5mm x0. 4mm，形状规则，正交晶系，具有强 烈的双重折射特性。莫奈林晶体甜度非常髙，说明肽链在晶体结构中并未离解。