乐业县乳糖
莫奈林娃从D. cumminsii的浆果果肉中提取出的甜味蛋白一般用水法抽提， 抽提液经离心分离、超滤浓缩后用离子交换色谱法提纯楮制，再经超滤脱盐后冷 冻干燥。起初，1kg浆果只能获得100?150mg的莫奈林，现在的提取得率已提 髙至3~5g。大批量处理时，可使用分批吸附法。先将水抽提液与分散在 0.02nu,l/L醋酸铵缓冲液（PH5.0)的吸附剂CM - Sephadex C25淤浆混合，接 着用水反复冲洗淤浆达到纯化的目的，然后用0.02mol/L NaCl溶液将吸附在 Sephadex上的莫奈林洗脱下来，超滤浓缩后冷冻干燥。这样分离得到的莫奈林， 若在离子交換色谱柱上分别用NaCl浓度呈梯度上升的PH7. 6和PH8. 2缓冲液进 行洗脱，还可进一步分级成5种纯组分，依次称为莫奈林I ~V,其中最主要的 是莫奈林IV。
后续的精制过程常用离子交换树脂法来进行，很多材料如硅酸镁、合成大网 络树脂及其他一些树脂可用来吸附水提取液中的一些杂质。最近人们热衷研究的 另一种精制方法，即膜分离法。
二、蔗糖的酯化、醚化和脱氧化衍生物
该法以甲苯为原料与氣磺酸进行氣 磺化时，有近一半的对甲苯磺酰氣副产 物生成，邻甲苯磺酰氣胺化成邻甲苯磺 酰胺的收率仅为75%?78%，因此，甲 苯法生产糖梢钠的总收率不足40%。
最后将L-天冬氨酸以N-苄氣苯基天冬氨酸或恶唑烷酮的形式与前两步反 应得到的D-丙氨酰胺缩合。苄氧基苯天冬氨酸溶解在多聚甲醛、对甲苯磺 酸和甲苯的混合液中，在lOOt回流lh,然后加人D-丙氨酰胺和三乙基胺在 60T下反应6h，反应结束后，反应液分别用lmol/L的盐酸和水洗，有机相用硫 酸镁干燥，过滤干燥得到阿力甜，产率为85%。
(-)两相体系中Z-Asp-PheOMe的合成反应动力学 要定量分析两相反应，首先需弄淸下列关系：①固定化酶催化反应在水相中进行，因此需了解反应在饱和有机溶剂缓冲 液中的动力学和平衡关系；②底物和产物在水相和有机溶剂中的分配比；③分配比引起的水相pH变化；④水相、有机相之间物质传递产生的影响；⑤酶在界面吸附引起的变化。
该表达系统以产朊假丝酵母(CandUla utihs)为莫奈林基因的宿主细胞，采 用的GAP启动子，对的核糖体蛋甶L41基W进行体外突变得到 的放线菌酮Uycloheximide, CYH)抗性基因作为标记基因，质粒构建后再线性 化，以多拷W整合至宿主染色体进行表达。
早期，人们观察到丨，2 -亚乙基甘醇和甘油之类的无环多元醉具有甜味。 这些简单的分子中包含与糖一致的结构特点，人们因此就很自然地推想到糖的甜 度与分子内的羟基总数目有关。然而人们很快就认识到，含有相同羟基数目的葡 萄糖和半乳糖所具备的甜度相差甚大，而含有5个羟基的木糖醇却比含有6个羟 基的山梨糖醉要甜得多。很显然，这种根据羟基数目推测糖分子甜度的假说是错 误的。
②不参与机体代谢，大多数人工合成甜味剂经口摄入后原原本本地排出体 外，不提供能量，适合糖尿病人、肥胖症人和老年人特殊营养消费群使用。
三氧蔗糖分子内6 - 0H……- C1氢键的存在，通过不能形成这种氢键的 6-脱氧蔗糖（400倍）的甜度较三氣蔗糖（650倍）低的事实而得到证实。因 此，3、0H/2-0作为三氣蔗糖分子的AHS/BS对是合适的，其疏水部位X包括 r-CH2、l'-CI、4-(：丨以及6'-(：丨。由于疏水部位X可以从三氣蔗糖的果糖基 单元扩展到葡萄糖基上轴向的C-4位，因此C-4位羟基的氣化对三氣蔗糖的 高甜度同样具有重要意义。
