四会市蔗糖素
图4-9中比较了以挤压膨胀淀粉、原淀粉、液化淀粉为葡糖基供体时，甜 菊苷的转葡糖基反应特性。挤压膨胀淀粉和液化淀粉的初始反应速率差别不大, 但挤压膨胀淀粉的转葡糖基反应上升更快，24h后得率达0.78，比液化淀粉 (0. 68)髙。原淀粉的转葡糖基反应很慢，这说明环糊精葡糖基转移酶不能有效 地进攻原淀粉的晶体结构。
Sarroch Theemsilp等还根据分子组成计算了分子质苗：。奇异果素的氨基酸部 分的分子质量为21257u，糖组分约占13.9%，因此总分子质鱼为24600U (约 25ku)，该值是由SDS - PAGE估测的分子质世28000u的88%。对于奇异果素分 子质量，若采用的测定方法或样品不同，结果也不同。在尚未得到纯样品时，根 据粗样品采用不同方法测得的奇异果素分子质迸均约是25ku的2倍。如用SDS -PAGE测定的未还原奇异果素的分子质谊为43kii，约是根据氨基酸组成及糖类 成分计算的分子质萤25ku的2倍。奇异果素的粗提物用0. 5mol/L NaCl从Sepha- dexG-75柱洗脱后，发现分子质世为52ku处的组分具有变味活性。在无DTT 的SDS-PAGE中，在431oi处有一条宽带，而奇异果素还原后，在28ku处有宽 带。天然奇异呆素用低角度激光散射（low angle laser light scattering)测定的分 子质量为90ku。这些结果表明天然粗奇异果素是25ku-肽的二聚体，纯奇异果 素娃该肽的四聚体，有可能杂质使得奇异果素二聚体难以聚合成为四聚体，并发 现奇异果素的纯四聚体和天然二聚体都有变味活性。
PGK，的3-磷酸甘油ft启动子；
也可以通过烟草表达莫奈林。首先合成了由噬菡体PI Cre重组酶介导的特异 ?组位点丨OXP的序列，构建了两个loxP同向重复的棺物表达栽体pGLX121. 1。 PCR定点突变了 CaMV 35S启动子元件中kozak序列，使kozak中的翻译起始密码 子ATG位于Ncol位点上。把spm基因克隆到表达载体pG〖MA的Ncol和PstI之 间，给甜蛋白8pm基因加上35S启动子和polyA及NOS终止子元件，然后克隆到 PGLX121. 1的EcoRI位点上，用农杆菌LBA4404转化烟草，获得卡那痗素抗性转 基因植株，经过PCR及southern分析，证明甜蛋白spm基因已整合到烟荩基因组 内。用转基因烟草的总RNA通过RT-PCR反转录扩增spm基因，证明了在35S启 动子及其他调控元件的控制下，spm基因在转基W烟草中转录表达出mRNA。提取 转基因烟草总蛋白，经SDS-PAGE分析，初步证明了 8pm基因在转基因烟草中表 达出目的甜蛋白。
1999年，我国有人采用原核生物偏爱的密码子合成了编码单链莫奈林的基 因，使其在大肠杆菌中得到高效表达，奂奈林达菌体可溶性蛋白的20%。在此 基础h，又对单链莫奈林基因进行定点突变，获得突变莫奈林基W，其产物甜度 是蔗糖的4500倍，较天然莫奈林甜度（是蔗糖的3000倍）有显著提髙，产量达 240mg/Lo
③蔗糖C - 3位的构型对甜味也很重要，因为C - 3位的差向立体异构体 (即异蔗糖）没有甜味。
要在酵母中表达嗦吗甜，首先要合成相应的基因。为使基因能在酵母中高效 表达，采用酵母优选密码子合成嗦吗甜I基因，为便于操纵DNA序列，在嗦吗 甜基因设计时在序列中包含多个限制性酶切点。嗦吗甜I基因长度为630bP,它 的DNA序列的5'端和1端分别为Bel I位点和Xho I位点。嗦吗甜I合成基因经 直接定点突变或DNA片段替换合成嗦吗甜A、B基因。将嗦吗甜I基因113位 的天冬酰胺的密码子替换为天冬氨酸的密码子即得嗦吗甜A基因序列，随后将 嗦吗甜A基因46位的天冬酰胺的密码子替换为赖氨酸的密码子即得到嗦吗甜B 基因。
(-)阿力甜的代谢在大鼠、小鼠、狗和人体身上进行的经口摄人试验表明，阿力甜能够被机体 消化吸收。被摄人的阿力甜有77%~96%以各种代谢产物通过尿排出体外，其余 7%-22% 一般未经代谢直接以阿力甜形式通过粪便排出体外。通过放射标记分 析表明，阿力甜在述四种机体中的代谢回收平衡达97% ~ 105%。图2-69所 示为阿力甜的代谢产物。
研究还表明，三氣蔗糖在狗、大鼠、小鼠、兔子和人体体内的代谢途径相 似。上述动物试验结果也适用于人。临床研究也确认三氯蔗糖的安全性。例如有 一个试验共有77个愿受试者参加，日摄入量达0.5g，在机体活动机能、生物 化学和血液学等方面均未发现任何变化。
