铁山港区甘草甜素
二、新型二肽同型物
对Brazzein分子中的半胱氨酸、赖氨酸、酪氨酸、组氨酸和精氨酸的化学修 饰均导致甜味的降低或丧失。Brazzein的半胱氨酸具有极为重要的结构意义，它 们的还原和S烷基化将导致Brazzein 二级结构的解体和三级结构的破坏，从而使 甜味活性丧失。仔细分析除半胱氨酸外化学修饰硓示的其他重要活性相关残基, 可以推测分子中的2个区域可能是其活性中心的组成部分：一个区域以a螺旋和 卢折叠的链DI之间的转角为中心，包括分子中唯一的组氨酸HiS31以及残基 Arg33、Lys27和Lys30;另外一个区域以冷折香的链II和链DI之间的转角为中 心，包括残基Tyr39、Lys42和Arg43。在Brazzein的三维结构中，含Arg33的区 域接近残基Tyr54和Tyt51，因此，它与C端有着密切的关系。总的说来，这些 数据表明，C端是Brazzein甜味产生的必要因素。
用含安赛蜜0% ~3%浓度的饲料喂养白鼠进 行潜在致癌性和慢性毒理试验，用含0% ~
现在，人们正努力研究以期分离出能引起上述反应的专一微生物。已发现很 多细菌具有分-葡糖犴酸酶的活性，能将甘草甜素水解成甘草亭酸。只有两种细 菌可将3 -脱氧-18 -卢-甘草亭酸还原成甘草亭酸或3 -表-18 -甘草亭酸。 从人的新鲜粪便中分离出的瘤符球歯属(Riimirwcoccus)具有水解甘草甜素生成 18 -P -甘草亭酸的功能，另外可将3 -脱氢-18 -甘草亭酸还原成对映体 3-表-18-0-甘草亭酸的梭状芽孢杆菌(Clostridium)也是从人刚排出的粪便 中分离出来的。这两种细菌的混合体能将甘草亭酸异构成3 -表-18 -办-甘草 亭酸，反过来也如此。这一过程可能是通过氧化中间体3-脱氢-18-/3-甘草 亭酸而进行的。甘草甜素转化成3-表-18-分-甘草亭酸是分几步进行的，其 中的终端异构物（isomer)是几种细菌的?种产物。所有变化可概括成：甘草甜
从枯草芽孢杆菌(SAtUis') NCIB 11871中分离得到的一种特异性果糖转移酶， 可以专一地将G-6-a转化为S-6-a,并获得得率较髙的S-6 - a。尽管这种特 异性果糖转移酶可能会受到G - 6 - a上乙酰基的位阻影响，但总的效果仍较为理 想。这种酶和通常所说的果糖基转移酶有关，但又有其特殊性。它不会通过重复地 转移果糖基单元形成果聚糖，而只能专一地将-?个果糖基单元转移到受体己糖单元 上得到二糖产物，这可能是W为该酶的活性中心太小以致不能容纳超过单糖大小的 糖分子受体，也可能是因为果糖基不是这种酶的最佳受体。因此，这种单糖专一性 的果糖转移酶，被定义为单糖专一性的果糖转移酶（EC2.4. 1.162)。
(三）甜菊双糖A苷的稳定性与甜菊苷一样，室温下甜菊双糖A苷是很稳定的。在1001下维持22h,只 有11. 5%的双糖A苷水解成双糖苷B和葡萄糖。在同等条件下，甜菊苷却有 20.6%发生水解。Chang和Cook通过试验表明，在酸性环境中双糖苷A要比甜 菊苷稳定得多。含有双糖苷A的磷酸或柠檬酸饮料，在室温下贮藏3个月，未 见有任何分解现象。
关于A环的反应情况尚不清楚，一般认为它可能被氧化成二氧化碳。用 [,4C]标记的二氢查耳酮试验表明除了上面提到的几种酸物质外，大鼠还能代谢 产生其他几种至今仍未被人辨认出的尿代谢物。薄层色谱分析表明，大鼠对用 [,4C]标记的新橙皮苷或经标记的二氢查耳酮的具有放射活性的代谢产物很 相似。
对天然和变异莫奈林的构型研究表明，莫奈林的三维结构和两条硫醉蛋白酶 抑制剂——Cystatin和Stefin B非常相似，这说明莫奈林除了甜味外还可能有其 他一些生物学功能。
简单的疏水D-氨基酸和合成二肽（如阿斯巴甜）就可以激活甜味受体。 所有这些分子，如谷氨酸，都有一个相同的氨基酸结构成分——这一结构成分由 羧基及其相邻的氨基组成u Morini等猜测，受体T1R2-T1R3的活性位点应保留 了所有这些必要特征，否则就不能与这一结构成分结合了。换句话说，在由 mGluRl推测T1R2-T1R3的结构时，位于mGluRl空穴壁上的那些结合由竣基 及其相邻的氨基组成的结构成分的极性残基应当高度保留。事实也证明， mGluRl中那些直接和由竣基及其相邻的氨基组成的结构成分发生相互作用的残 基确实完好地保留了下来。相反，研究人员估计，空穴其他部分的残基，即 mGluRl中那些结合谷氨酸侧链的残基，可能在T1R2-T1R3中由极性转为非极 性。Morini等通过对四个模型的研究，发现结合谷氨酸的由羧基及其相邻的氨基 组成的结构成分的残基在所有原体中都完好保留，而mGluRl中联结谷氨酸盐侧 链的残基则变成极性更弱或不带电的残基。
由于双酶-化学联合法在氣化衍生方面，与传统的纯化学方法一致，本节仅 对其中S - 6 - a的酶法合成部分做详细研究和探讨。
