柳州市罗汉果苷
这些蔗糖衍生物的化学制备涉及许多步骤，通常为丨5 ~20多个反应，这不 可避免导?致产物得率比较低，因此以上提到的蔗糖衍生物的制备多数只存在理论 上的可能。但是通过进一步研究蔗糖衍生物的味觉品质，可以得出甜味分子结构 与甜度之间的关系。通过大鱼研究表明，蔗糖C-4、C-l\ C-4\ C-6'上任 何位置被卤素取代，所得蔗糖卤代衍生物甜度都比蔗糖强，而C-6上的取代则 可能导致甜味降低甚至产生苦味。
(一）利用半乳糖苷酶改性甜叶悬钩子苷
2)两种不同大小的甜味剂与了丨拟-丁丨㈦的活性态Aoc-AB的结合[较小的甜味剂结合于闭合的 T1R2 (A)部位上，较大的甜味剂則结合于打幵的T1R3 (B)部位.且占用了 LB丨和LB2上的残基]
快徒性
实验中对24h后积累在反应混合体系中的还原糖数量进行了测定。挤压膨胀 淀粉体系中只有0.34g/L，与液化淀粉的7.84g/L相比很小，环糊精葡糖基转移 梅催化挤压膨胀淀粉表面的非还原性端，因此还原糖代表的低聚麦芽糖的最较 小，因此甜菊苷转葡糖基得率较高。
C-2上氧代对甜味具有很显著的影响，例如2，6，6'-四氣甘寐蔗糖 非常苦，苦味儿乎与奎宁差不多。用甲烷磺酰氣和二甲基甲酰胺先在-20尤下对 蔗糖处理2h，再在70T下处理10h,可有选择性地在C-6和C-6'上氣化，产 率在50%左右。在二甲基甲酰胺中，201下，用2，2-二甲氧基丙烷和对甲基 苯磺酸对其进行缩醛化作用，处理4h,然后在嘧啶中川醏酸酐使其乙酰化，除 去环乙缩醛，生成c-r和C-2位未被保护的蔗糖衍生物。用磺酰氣和氣化锂 将其氣化，脱脂后生成苦味的2，6，厂，6、四氣忡露蔗糖。
不同的Candida utilis菌株电脉冲转化的效率有较大不同。将Bgl D酶切后的 PCLRE2通过电穿孔转化至ATCC9256和ATCC9226，都能得到CYH抗性菌落， 多拷贝载体DNA也串联整合至rDNA区，但转化率都不到ATCC9950的10%。 整合至ATCC9256的pCLRE2拷贝数为6~8，整合至ATCC9226的拷贝数为 5-9,整合至ATCC9950的拷贝数为10?12。
分离提纯过程，主要根据嗦吗甜的水不溶性及电荷特性进行。阁5-4所示 为从酵母中分离提纯嗦吗甜的流程图，得率达80%，纯度>95%。在该流程后， 还可以冉进行SDS凝胶电泳或在离子交换层析后，在lOOmmol/L醋酸中进行 SP-SphadexG-75凝胶过滤，去除少萤杂蛋白。提纯结果表明，转化酵母中的 嗦吗甜约占不溶性蛋白质的20% (或总蛋白质的10% )。
中数日。收集，水洗，再用lOOOmL水进行重结晶，干燥后可得晶体206g (熔点 150g),得率约82%。若再用甲醇重结晶一次，可得晶体199g (熔点 172-174*00为了最大限度地提髙纯度，最好再用甲醇敢结晶一次。
点。以上两种三氣蔗糖衍生物分子结构处于这种构象时，能量最低，分子C -6羟基为反式非对称（gauche-trans)，并且己酮糖环上的一级氣取代基为 非对称-非对称（gauche-gauche)构象。如果甜味分子的构象不是局限在 少=75°和屮= 95°,那么得到的两种三氣蔗糖衍生物扭曲角均为少=82. 5。， 少=13.8°。研究表明，果聚糖苷衍生物均比塔格糖苷衍生物稳定，其中扭 曲角为少=82. 5°和屮= 13. 8°的果聚糖苷衍生物稍微比扭曲角处于少=75° 和少= 95°的果聚糖苷衍生物稳定，C-6羟基为反式非对称，氣取代基都为 非对称-非对称构象。
