鹤庆县木糖
用固定化酶催化合成肽的反应条件优化要考虑3个因素：间定化酶的稳定 性、反应时间和平衡得率。图2-25 (1)所示为a = 15时，固定在Amberlite XAD-7的嗜热菌蛋白酶稳定性、平衡得率、相对起始反应速率。裁体内部最优 pH为5~6。当PH <5时，起始反应速率低且酶不稳定；pH >6时，平衡得率急 剧下降。在大多数情况下，多孔载体内的pH只由底物和产物的缓冲作用决定， 用酸或碱中和的方法很难调节。这是阂定化酶以非水溶性有机溶剂为介质催化合]’可增加酶的稳定 性，但得率仍会逐渐下降。在CSTR整个反应器中，底物和产物浓度各处均 相等。
转化菌株TB2bl -44中已含有B2作启动子的表达盒，再经质粒pG丨)71 (该 质粒含有gdhA启动子和潮霉素抗性基因作标记基因的表达盒）转化得到双转化 体（double transfonrnin丨），从中选择产率较高的双转化体TB2bl - 44 - GD4、 -GD5、-GD6、-GD7在MDFA优化培养基摇瓶培养后达到最高的表达水平
二、阿力甜的物理性质和化学性质
①合成马槟榔D的A链（Glul-Asp33)和B链的三个片段（Glul-Pro20、 Cyc21 - Gly41 和 Pro42 -Trp72)；
安赛蜜是一种氧硫杂环吖嗪酮类化合物，化学结构如图6 -21所示。 其环上5、6位上的取代基不同，对甜味强度有明显影响，且取代生成物 中也有没有甜味的。1978年WHO注册登记时，采用Acesulfame钾盐的名 称，故简称为Acesulfame-K。目前世界上共有90多个国家允许安赛蜜在 食品饮料上的应用。1983年由英国开始认可使用，1988年美国开始认可 使用，1994年世界食品添加剂联合专家委员会提出的 安赛蜜人体每H最大摄人童ADI值为15mg/kg，日本 厚生省也于2000年4月25日批准了安赛蜜的使用。 ^S J
因为嗦吗甜分子能与食品或饮料中的阴离子组分发生反应，因此，在不降低 分子总体甜度的前提下，人们正致力于降低嗦吗甜分子总电荷虽的研究。阿拉伯 胶及其微酸性聚合物能阻止嗦吗甜与合成包素的反应。往嗦吗甜溶液中添加至少 6份（但不多于20份）阿拉伯胶能阻止它与酒石黄、口落黄或丽春红-4R—类 色素结合而发生沉淀或浑浊现象。即使将阿拉伯胶-嗦吗甜混合液离心处理也是 如此。当阿拉伯胶添加量超过20份时，嗦吗甜的甜味有所受抑制，至少比添加 6份时的甜度低，而且溶液也不很稳定。较好的比例是9份的阿拉伯胶添加1份 的嗦吗甜，这样配制出的混合物体积大，易于操作。这种混合物还可与麦芽糊 精、乳糖或山梨糖醇混合，以利于进一步发挥填充剂的物理性质。因为嗦吗甜的 甜度很大，即使添加了很大数世的填充剂，如1份的嗦吗甜添加20份的填充剂， 其甜味特性也没受到明显影响。往饮料中添加5mg/kg的嗦吗甜能增强产品风 味，此时苒添加lOOmg/kg阿拉伯胶，产品的稠度和口感也不会发生什么变化。
在没有其他食品成分存在的前提下，通过品尝一种甜味剂水溶液，即可确定 该产品的甜味质量。供品尝的三氣蔗糖溶液的甜度接近8%的蔗糖液，并用柠按 酸调节溶液pH至3. 5。如图3-12所示的结果表明，三氣蔗糖的甜味质量与蔗 糖很相似，它没有糖精、甜蜜素、甜菊苷之类强力甜味剂所带有的不愉快后味。
当带嗦吗甜基因的质粒转移人酵母，在选择性培养基上培养一段时间后， 在相应的培养基中发现了甜味嗦吗甜A、B,且分子质粗均与成熟嗦吗甜的分 子质量相同。嗦吗甜I虽用同样方式生产，但没有出现在培养基中，该结果与 它不能在体外折叠相符。由此可以看出单个氨基酸变化对蛋白质结构影响 很大。
m3-33酶法合成S-6-a的反应过程
Goodman及其合作者制备了一系列二肽化合物（表2-67)，以便于探索甜 二肽对“上面”基团空间体积的要求，这些化合物的碳中心被充分取代。分析 认为，碳中心的充分取代会降低但并不会消除化合物[7]和[168]的甜味。 二甲基甲酯二肽化合物[170]是甜的，但二乙基对成物[171]却没有甜味。 在环烷基系列二肽化合物中，从环丙基至环戊基的二肽均有甜味。环戊基二肽化 合物可以认为是因连接甲基团而形成的二乙基二肽化合物的受限对映物（c
