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此外,给男性和女性II型糖尿病患者2周剂S从0.5到1.5mg/(icg*d)的 纽甜和安慰剂。体检时没有发现临床上重要的或与纽甜有关的包括体觅和重要生 命指征的改变,没有出现与纽甜有关的任何临床上東要的生化、血液学、生理的 或主观的改变,并且在纽甜和安慰剂组之间所报道的不良体验没有差异。另外, 用任何一种剂量的纽甜与安慰剂比较,没有观察到对血糖水平(图2-55)、或 胰岛素浓度(图2-56)、或对血糖控制的影响。用剂董髙达15倍于90%预测消 耗萤的纽甜所做的临床耐受试验结果显示,纽甜可以在一般人群(包括D型糖 尿病患者)放心使用。这些人体试验的结果表明,纽甜即使在剂量远远超过预 测的消耗水平时仍是安全的,而且被很好地耐受。
采用电穿孔法,将质粒转至产朊假丝酵母(Candida ulUis)中。该方法较简 单并能实现Candida utUis的高效转化。对转化条件进行优化以达到最优转化率。 据研究,酵母在最优电脉冲转化率下存活率为50% -70% ,因此通过调整场强、 内阻和电容大小,使Candida utUis的存活率达10%?70%。在加了4(Vg/mL CYH的YPD平板培养基上培养C— ulUis转化体(4(Vg/mL CYH是野生塑 Candida ulilis能在YPD培养基生长的最高浓度),进行CYH抗性转化体选择。 YPD培养基组成为:2%葡萄糖、l%BaCto酵母抽提物、2%Bacto蛋白胨。由于 电脉冲导致酵母细胞膜的破裂,使细胞对渗透压更敏感,因此电脉冲处理后细胞 立即在YPD培养基上培养不形成菌落D电脉冲处理后细胞立即分散在选择性培 养基,也不能得到CYH抗性菌落,需在30弋含lmol/L山梨糖醉的YPD培养基 上预培养一段时间后,再转移至含CYH的培养基才能得到转化子。
总的说来,具有高效甜味的二肽化合物在分子结构上不仅必须具有符合一定 距离的两性离子,能增强其甜味的疏水基团(X)还葙要处于生甜团(AH-B) 附近的合适位置。而具有甜味的二肽化合物在水溶液中的构象一般呈现L-型或 延展型。此外,二肽分子三维模型中的D区域处若能被某一基团填满,或者二 肽化合物带有的两个芳香环相互靠近,产生较强的分子内作用,都能显著提高二 肽分子的甜度。
{二)低温混合物的形成
Searie公司的研究人员最早对二肽分子的结构差异做丫研究,发现C -端氨 基酸可用一系列简单的胺分子来替代。为叙述方便,通常将二肽分子的结构特性 归纳为纸平面上的两个基团R,和R2, R,指“上面”基团,比指“下面”基团。 如表2-41所示,化合物[2]是由苄胺衍生而来的,缺少a-取代基R,,所以 没有甜味。由苯异丙胺衍生而得的氨化物[3]具有甜味,这说明酯基团并不是 必需的。同样是由苯异丙胺衍生的氨化物[4]却无甜味,这与阿斯巴甜甜二肽 分子L-或D-苯丙氨酸所表现的差异性,反映出对立体化学的要求是一致的。 在表2-41列出的K,基团(H、CH2OH)中,甲基具有的甜度最大,这表明较
(2)去除细黹序列后的质粒pRMlI和PUM1丨的可能整合方式 注:中链奐奈林和CYHf?因的转录方向如箭头所示; 用于转化的?粒均在BglB位点断开 < 方框所示); 限制性》切位点缩写:
(-)甜味受体的发现
理试验结果。同年,Pomaret和Lavieille报道认为甜菊苷未经任何结构变化就排 出体外(试验使用的是纯净甜菊苷样品 >。与此形成对比的是,Pomaret早先证 实具有致羊血红细胞溶血作用的是水浸出物,为一种黄色的非纯净样品。
三氯蔗糖是以蔗糖为原料经氣化作用制得,图3-1所示为其化学结构式。 X-衍射分析表明它是一种带有空间的正交晶体,每个晶体单元包含4个三氣蔗 糖分+,在0H-2和0-3'之间有一分子内氢键,这氢键能阻止两环之间糖苷 键的旋转。核磁共振分析表明,它在二甲基亚砜中的氢键主要是位于OH-3'和
图6 - 1糖楮、糖楮钠和糖梢钙的化学结构
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