西宁市爱德万甜
不同的有机溶剂，也会影响合成速率和平衡得韦。押论和实验都表明，乙酸 乙酯是最好的溶剂（表2 -7)。根据上述结论，我们分别用活塞流式反应器 (plug flow type, PFR)和连续搅拌釜式反应器（CSTR)进行试验，用固定在 Amberlite XAD-7的嗜热菌蛋白酶进行连续催化反应。首先将80mmol/L Z - Asp ^ 200mmol/L PheOMe溶解于饱和乙酸乙酯溶液，然后以外=1.5/h连续加人 PFR中，体系温度保持在40T。初始阶段反应得率>95%，反应进行80h后, 下降到30%左右（图2-26)。固定化酶发生了钝化，其主要原因是：在PFR 中，底物浓度在人口处最大，顺宥出口方向逐渐减小，人口处高浓度的Z-AsP 使嗜热菌蛋白酶的主要稳定因子Ca2<被螯合脱去，而且人口处固定化酶内部的 pH最低，使更容易被脱去。在底物中加入5mmol/LCa[ Z - Asp =80m?K)l/L, ct = 15。
因为所有的动物体内研究，包括长达2年的慢性毒理试验均表明甜菊苷是无 毒的，因此上述的试验结果已引起人们的关注，但甜菊醉是在小白鼠体内产生 的，白鼠的微生物群系与人体的有所区别，且试验所用的甜菊苷浓度至少是正常 食品中可能使用量的丨00倍以上。在消化道内浓度的稀释必然极大地减少了可能 发生突变的机会，因此，对这个实验结果不必太紧张。
为检测酵母嗦吗甜是否具有甜味构型开发了 WA检测方法（radioirmmmoassay, 放射免疫分析法）。小鼠接种纯嗦吗甜A后会产生单特异性抗体（monospecific antibodies),它的免疫血淸稀释约50000倍后能选择性地与天然（甜味）构型的嗦 吗甜发生反应，时非天然构型、变性嗦吗甜或嗦吗甜的肽段与抗体的结合能力远不 及天然嗦吗甜。RIA可测定的嗦鸣甜最低浓度为Ing/mL，敏感度约是感官品尝试 验的丨000倍，并且适用范围也更广，对粗提物等都可以测定。将溶于SDS的酵母 嗦吗甜经SDS凝胶电泳分离后转移至硝化纤维滤纸富集，用稀释2000倍的老鼠嗦 吗甜A血清抗体进行检测，发现富集后的变性嗦吗甜及其溶解在SDS中的部分都 能被该血清抗体识别，该被识別组分在电泳中与植物嗦吗甜一起发生迁移。但对酵 母提取物进行RIA分析，没有发现能发生交叉反应的可溶性蛋A质，这可能是由 于酵母细胞内的还原态环境使嗦呵甜的二硫键还原而使蛋A质发生变性沉淀，因而 细胞中就+存在天然水溶性的嗦吗甜。并且由于蛋白质N端没有连接分泌信号序 列，细胞不分泌蛋白质。
正因为如此，唾液对味觉的引起关系甚大，如把一块十分十燥的糖块放在用 滤纸擦干的舌表面是感觉不到任何甜味的。唾液是食物的天然溶剂，它是由三对 大唾液腺（腮腺、颌下腺和舌下腺）和无数小唾液腺注入PI腔中的。大唾液腺 在分泌唾液中起着主要的作用。巴甫洛夫的实验证明，唾液分泌腺的活动在很大 程度上与食物的种类相适应。唾液不仅能湿润和溶解食物，而且还有洗涤口腔的 作用。洗涤口腔可使味莆不再受其他物质的干扰，以达到更精确地辨认某种味觉。
反应体系中的葡萄糖副产物，以及约有超过40%未发生反应的G-6-a,可 以通过回收而敢新利用，吸附在DEAE-纤维素柱上的果糖转移酶，也可以通过 用O.5mol/L磷酸盐缓冲液洗脱而实现循环使用。但在反应过程中，利用树脂将
关于A环的反应情况尚不清楚，一般认为它可能被氧化成二氧化碳。用 [,4C]标记的二氢查耳酮试验表明除了上面提到的几种酸物质外，大鼠还能代谢 产生其他几种至今仍未被人辨认出的尿代谢物。薄层色谱分析表明，大鼠对用 [,4C]标记的新橙皮苷或经标记的二氢查耳酮的具有放射活性的代谢产物很 相似。
日本的板元也是通过皂化方法转化甜菊双糖D苷成双糖B苷，而双糖A苷 则可通过水解酶转化作用转化成双糖B苷（图4-17)。
图4-33甘草甜素（甘草酸）和甘草亭酸的化学结构 (1)甘毕酸 (2)甘莩亭酸
