陵城区甜菊糖苷
在这之后，偶然又发现L-3三氟乙酰氨基-/V-琥珀酰二苯胺[丨29]和
政府管理部门基于不同的政策和个别机构的惯例，即便使用相同的临床前期 安全性资料，也会制定出不同的无毒副作用水平。其结果是，不同的机构对同一 种混合物可以制定出不同的可接受的每日摄入量。比如，在缺乏任何毒性指征的 悄况下，世界卫生组织食品添加剂联合专家委员会在制定无毒副作用水平和可接 受的每日摄入最时，不认为由于食物可口性的降低和食物消耗的减少所致的体重 增长减悵是副作用，而美国食品与药物管理局（FDA)则把这些因素都考虑 进去o
最优条件主要考察反应酶浓度、反应时间和混合物含水量对反戍的影响。 ?-胰凝乳蛋I1丨酶浓度从3% ~20% (w/w)等不同浓度对反应产率的影响见图 2-63。如图所示，反应产宇随酶浓度的增加而不断上升，在15%浓度时产率达 到53% (mol/mol),此后，随酶浓度的增加，反应产率上升幅度趋于平缓。图2 -62 N-苄氧羰荩-L-天冬氨酸二乙酯和D-内氨酰胺组成的二元体系的熔点 +没有加水，含有12%的水作为轜佐剂 +混合钧中含水摄15%酶浓度(w/h>V%图2 -63 ?-胰凝乳蛋卩1酶浓度对A’ -苄氧羰基-L -天 冬氨酸乙酯-D-丙氨酰胺产率的影响 +混介物中含水*15%,反应8h由图2-64可知，反应产率随着反应时间的增加而增加，反应约8h后达到 最大产率53%。随着反应的进行，反应物的减少和产物的产生改变了反应混合 物的低熔点特性，使反应混合物逐渐固化。最后，反应由于反应混合物的固化太 严重而几乎停止。S 2 -64 反应时间对N -苄氧羰基-L -天冬氨酸 乙酿-D-丙氨酰胺在低熔点混合物中产率的影响 注：其中/V-苄氧簾基-L-天冬软酸二乙酯和D-丙氨酰胺分别加人0.5mmol,混合物中含水S 15% (?/?), 胰凝乳蛋A酶浓度为丨5% (?/?>?
组成蔗糖的两个单元——葡萄糖和果糖，当它们被转化成甲基- a - D -吡 喃葡萄糖讦或海藻糖和甲基-D -吡喃果糖苷时，形成的化合物甜度分别只 有蔗糖的丨/丨0和零，这说明甜味化合物要求生甜团三角形呈-种特殊的排列组 合。处于结晶状态和溶液状态的蔗糖，其a-丨）-吡喃葡萄糖基单元的构象楚椅 式（4C,)，而其沒-D-呋喃果糖基单元的构象是船式（3T4);呋喃环在它的右 角处连接于吡喃环平面上，娃通过两个分子内氢键0-6'连接于0-5和厂连 接于0-2而实现的（见图3-38，未加“”’符号和加了 符号的数字分别表 示葡萄糖甚和果糖基单元上的碳原子和被犇近的氣原子）。
(二）反应平衡关系
同源建模及对接研究有力地证明了，受体上有两个结合小甜味分子的活性位 点和一个结合甜味蛋白的活性位点。由于甜味化合物的复杂性和多样性，很自然 地，人们会怀疑是否有另外的结合部位存在。确实，在最近的几年里，许多分子 生物学实验，都有助于解释甜味受体和不同配体的相互作用，并为多结合位点的 观点提供有力证据。到目前为止，发现的可能的另外部位主要有两种：一种焙结 合甜赉素和丨actisole (—种甜味抑制剂）的部位，另外一种是结合其他甜味蛋白 的部位。
(二）四氣棉籽糖的酶法水解
B链的Asp残基被Asn替换后分别得到[ASnKl ]-莫奈林和[ASnw ]-莫 奈林的类似物，它们的甜度分别是蔗糖的7000倍和20倍，而用Abu替换Asp117 得到的类似物[Abi^]-莫奈林完全没有甜味。这表明：位于《-螺旋内的 Asp821被Asn替换后，可能会引起莫奈林分子构象的微小变化，或者更有利于结 合受体；ASpOT位于莫奈林分子内a-螺旋的起始部位，在分子的表面有游离的 办-竣基，能以离子键的形式与受体相结合，可能是莫奈林的活性部位； [Asnm]-莫奈林之所以也具有部分甜味，可能是Asn87与受体以氢键的形式相结 合的结果。此外，还对英奈林仅有的一个CySw的作用进行研究，结果发现：用 Ser替换Cy8w后，得到的[Ser8^ ]-莫奈林类似物的甜度是蔗糖甜度的2000 倍，并且该类似物在水溶液中的稳定性明显下降，与人工合成的莫奈林的构象略 有不同。可以肯定，Cys残基上的一SH基团在保持莫奈林的天然甜味构象方面 起着重要的作用。
