寒亭区低聚半乳糖
②分子能够同时缚住两种受体.并激发之产生两种味。
(-)从甜菊叶子中提取甜菊双糖A苷在过去的10多年中,人们作了很大的努力企图从甜菊叶子中提取双糖A苷 进行商业化生产。已知提取T.艺中用来分离甜物质的是髙度极性溶剂——水,这 是因为甜菊苷仅微溶于水而双糖苷A在水中的溶解度很大。通过浓缩去掉水, 然后再用甲醇提取即可优化先分离出双糖苷A产品,但其中还含有部分甜菊苷。 去除甲醇后通过二氧化硅胶柱采用丙醉-水-乙基乙酸盐溶液作流动相进行色谱 分离,再在戊醇水溶液中通过重结晶方法即可得到纯净的甜菊双糖苷A。通过这 种方法,可从叶子中提取出0.25%的结晶双糖苷A。而不经色谱分离则可从干
图4 - 35甘苹单甜素对2%蔗糖液中S. muians依附作州的影响
图5 - 1所示为嗦吗甜分子三级结构示意图。
X疏水基团的引入同时也成功地解决了与甜味相伴的手性反常问题。因为 AH、B甜味理论不能解释这样一个事实:大部分D-氨基酸是甜的,但它的 L-对映体却不甜;而糖的D、L-对映体则都是甜的。AH、B. X甜味三角理论 认为,甜味蛋白受体的三个结合基团(一NH/、一0H、一R)是呈顺时针方向 排列的,因此甜味分子中的AH、B、X (如果有的话)生甜团只有呈顺时针方 向排列时才能和同样以顺时针方向排列的甜受体发生键联,从而产生甜味刺激, 如图1 -12所示。
叶中提取出6. 5%的甜菊苷。由此可见,提取法经济效益很差,因此许多研究人 员都在致力于通过化学途径使甜菊苷转化成甜菊双糖苷A的研究。
4.对甜味分子空间结构要求的设想由于甜味感觉对底物的要求可以是小如CHC13分子,到大如多肽和大分子蛋 白质,因此可以认为,甜味化合物和甜味蛋白受体之间最初的相互作用,发生在 受体表面部分。对于那些与受体之间无疏水接触的甜味剂分子,由于这种表面吸 附之间的作用力相对较低,故其甜度也低,这也许就是糖和糖醉均不是很甜的原 因。对于那些与受体之间有一处或多处疏水键合的甜味剂分子,除了在AH、B 基闭上的两点接触外,更包含有空间上的疏水键合,这种更深层次的键合则很可 能发生在甜味蛋白受体中类似酶活性位点的“嵴”或“裂缝”中。
由于嗦吗甜有8个二硫键,因此其分子十分稳定,其抗变性能比其他绝大多 数水溶性蛋白(如白蛋白或溶菌酶)都来得强。光谱分析表明,它的a-螺旋度 较低(大约只占整个分子14%),分析其氨基酸组成也可预测到这点。这表明它 并不完全是刚性分子,它的旁链大多处于可溶解的环境中。
为确定变性酵母嗦吗甜能否在体外折奋成甜味构型,先对已被还原的变性植 物嗦吗甜进行折叠复性预备试验。植物嗦吗甜分子中有8个二硫键(图5-1), 因此稳定性很好,但同时也使其还原和复性都很闲难。Ellman’s试剂[5, 5# - dilhiohis - (2 - nitrobenzoic acid)]的二硫键还原过验证实了植物味吗甜的二硫 键对还原作用很稳定:2个稳定的二硫键需在37弋、PH9、8moI/L尿素中经 50mm?l/L (3 -巯基乙醉作用2h才能完全被还原。